| 角蛋白19片段单克隆抗体的制备及鉴定 |
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| 引用本文： | 张慧茹,翟晋豫,刘珍,王雪琴,孟素香.角蛋白19片段单克隆抗体的制备及鉴定[J].动物医学进展,2014(12). |
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| 作者姓名： | 张慧茹 翟晋豫 刘珍 王雪琴 孟素香 |
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| 作者单位： | 1. 河南工业大学生物工程学院,河南郑州,450001
2. 河南省生物工程技术研究中心,河南郑州,450001 |
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| 基金项目： | 河南省攻关项目(132102310169)；河南省重点攻关项目 |
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| 摘 要： | 为制备角蛋白19片段（CYFRA21-1）的单克隆抗体（mAb），采用间接 ELISA 方法检测免疫小鼠的抗体效价，融合、筛选、克隆化单克隆抗体，将筛选得到的单克隆细胞株注入小鼠腹腔制备腹水，采用辛酸硫酸铵法、蛋白 A 柱纯化腹水抗体，以 SDS-PAGE 凝胶电泳、紫外分光光度法检测抗体纯度和浓度；利用鼠抗体亚型鉴定试剂盒对单克隆抗体进行亚型鉴定；采用阻断 ELISA 法测定 mAb 的敏感性（IC50）。结果表明，筛选获得4株分泌角蛋白19片段 mAb 的细胞株，将4株细胞株2F9、3H5、7C3、6F11注入小鼠腹腔，分别获得效价为2．56×105、5．12×105、5．12×105、2．56×105的单克隆抗体，经纯化，抗体蛋白浓度为12．43 mg／mL～16．00 mg／mL，为 IgG1型抗体，其 IC50在1．03 ng／mL～1．53 ng／mL 之间。说明获得了4株分泌高效价 CYFRA21-1单克隆抗体的细胞株，为建立 CYFRA21-1的检测试剂盒奠定了基础。
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| 关 键 词： | 角蛋白19片段(CYFRA21-1) 单克隆抗体 IgG 鉴定 |
Preparation and Identification of Monoclonal Antibodies Against Cytokeratin 19 Fragment |
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| ZHANG Hui-ru,ZHAI Jin-yu,LIU Zhen,WANG Xue-qin,MENG Su-xiang.Preparation and Identification of Monoclonal Antibodies Against Cytokeratin 19 Fragment[J].Progress In Veterinary Medicine,2014(12). |
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| Authors: | ZHANG Hui-ru ZHAI Jin-yu LIU Zhen WANG Xue-qin MENG Su-xiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cytokeratin 19 fragment monoclonal antibody IgG identification |
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