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| 鸡传染性喉气管炎病毒gD基因的表达及间接ELISA检测方法的初步建立 | |
| 引用本文： | 杨明凡,崔保安,张素梅,陈红英,李祥瑞.鸡传染性喉气管炎病毒gD基因的表达及间接ELISA检测方法的初步建立[J].中国兽医学报,2009,29(3). |
| 作者姓名： | 杨明凡 崔保安 张素梅 陈红英 李祥瑞 |
| 作者单位： | 1. 南京农业大学,动物医学院,江苏,南京,210095;河南农业大学牧医工程学院,河南,郑州,450002 2. 河南农业大学牧医工程学院,河南,郑州,450002 3. 南京农业大学,动物医学院,江苏,南京,210095 |
| 摘 要： | 将含有ILTV gD糖蛋白基因的重组质粒pMD-T-gD用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切后,回收目的片段,将其连接到原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-gD.将pET-gD转化到宿主表达菌BL21中,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE结果显示表达目的蛋白大小为55 000,Western blotting表明表达产物具有良好的免疫原性.表达的蛋白产物经纯化后作为ELISA包被抗原,以辣根过氧化物酶标记的羊抗鸡IgG作为二抗,初步建立了间接ELISA诊断方法,并确定了抗原最佳包被浓度为24.5 mg/L;最佳血清稀释度为1:80,初步确定ELISA判定标准为D450≥0.25判为阳性,小于0.25为阴性. |
| 关 键 词： | 鸡传染性喉气管炎病毒 gD基因 原核表达 间接ELISA |
Expression of gD gene of infectious laryngotracheitis virus and primary development of indirect ELISA assay based on the expressed protein |
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| YANG Ming-fan,CIU Bao-an,ZHANG Su-mei,CHEN Hong-ying,LI Xiang-rui.Expression of gD gene of infectious laryngotracheitis virus and primary development of indirect ELISA assay based on the expressed protein[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2009,29(3). | |
| Authors: | YANG Ming-fan CIU Bao-an ZHANG Su-mei CHEN Hong-ying LI Xiang-rui |
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