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采用正交设计方法优化梨ISSR-PCR反应体系
引用本文:曾艳玲,谭晓风,曾晓峰. 采用正交设计方法优化梨ISSR-PCR反应体系[J]. 湖北农业科学, 2008, 47(11)
作者姓名:曾艳玲  谭晓风  曾晓峰
作者单位:中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室,长沙,410004;中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室,长沙,410004;中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室,长沙,410004
基金项目:湖南省科技三项基金 , 中南林业科技大学青年科学基金  
摘    要:采用正交设计的方法对梨ISSR-PCR反应体系的5因素(Taq DNA聚合酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物的浓度)在4水平上进行优化试验,PCR结果用DPS数据处理软件分析,建立的梨ISSR-PCR的最佳反应体系(20μL)为:Taq DNA聚合酶1.0U、M2+的浓度2.0mmol·L-1、模板DNA 10~80 ng、dNTPs 0.10mmol·L-1、引物0.3 μmol·L-1.对梨ISSR-PCR最佳反应体系进行了梯度退火试验,得到的最佳退火温度为55℃.

关 键 词:  正交设计  ISSR-PCR

Optimizing ISSR-PCR System of Pear by Orthogonal Design
ZENG Yan-ling,TAN Xiao-feng,ZENG Xiao-feng. Optimizing ISSR-PCR System of Pear by Orthogonal Design[J]. Hubei Agricultural Sciences, 2008, 47(11)
Authors:ZENG Yan-ling  TAN Xiao-feng  ZENG Xiao-feng
Affiliation:ZENG Yan-ling,TAN Xiao-feng,ZENG Xiao-feng(The Key Lab.of Non-wood Forest Product of Forestry Ministry,Central South University of Forestry , Technology,Changsha 410004,China)
Abstract:
Keywords:ISSR-PCR
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