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| EHEC O157：H7紧密黏附素C300与LTB融合基因克隆与序列分析 | |
| 作者姓名： | 蒋丽 姜炎硕 李明成 |
| 作者单位： | 北华大学医学检验学院,吉林吉林132013 |
| 基金项目： | 吉林省科技发展计划项目（200805103） |
| 摘 要： | 目的构建肠出血性大肠埃希菌（EHEC）O157：H7紧密黏附素C-端免疫保护片段与肠黏膜佐剂大肠埃希菌不耐热肠毒素B亚单位（LTB）的融合基因克隆载体,为进一步研究EHEC O157：H7重组疫苗奠定了基础.方法设计引物采用PCR技术从EHEC O157：H7基因组中扩增Intimin C300的编码基因,从肠产毒性大肠埃希菌基因组中扩增LTB的编码基因,分别构建克隆载体pUC18-C300和pUC18-LTB,采用酶切位点相连技术,构建pUC19-C300-LTB克隆载体,并测序.结果从EHEC O157：H7基因组中扩增出了900 bp的目的片段,从肠产毒素大肠埃希菌基因组扩增出了275 bp的目的片段,分别插入载体pUC18和pUC19,经酶切及测序鉴定与目的序列一致.结论克隆出EHEC O157：H7的紧密黏附素C-端免疫保护片段与不耐热肠毒素B亚单位基因,并成功构建融合基因克隆载体,测序正确. |
| 关 键 词： | 肠出血大肠埃希菌O157：H7 紧密黏附素C300 不耐热肠毒素B亚单位（LTB） |
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