| 导入外源DNA的大豆根瘤菌22—10基因工程菌株的构建与分析 |
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| 引用本文： | 缪礼鸿,周俊初.导入外源DNA的大豆根瘤菌22—10基因工程菌株的构建与分析[J].华中农业大学学报,1993,12(3):255-264. |
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| 作者姓名： | 缪礼鸿 周俊初 |
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| 作者单位： | 华中农业大学生物技术中心，华中农业大学生物技术中心 武汉 430070，武汉 430070 |
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| 基金项目： | 国家“863”高技术研究发展计划资助 |
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| 摘 要： | 通过三亲本杂交,分别将紫云英根瘤菌7635R的基因文库和慢生型大豆根瘤菌22-10的基因文库引入到慢生型大豆根瘤菌22-10中,获得了大量的含有外源DNA片段的转移接合子。以结瘤试验作选择标准,从中筛选到3株具有较高固氮效率的基因工程菌株HN5-1、HN5-2和HN22-2。采用反向杂交,将接合子HN5-2中的外源重组质粒转回到大肠杆菌中,提取质粒作EcoRI酶切。表明pLAFR1质粒载体上携带有大约20 kb大小的DNA片段。实验还证明,在含有从根瘤菌转移而来的pLAFR1质粒的大肠杆菌细胞中,常伴随有辅助性质粒pRK2013的存在,用四环素和卡那霉素两种选择性抗性可淘汰其中的pRK2013质粒而仅保留有来自根瘤菌的pLAFR1重组质粒。
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| 关 键 词： | 大豆 根瘤菌 杂交 |
CONSTRUCTION AND SCREENING OF BRADYRHIZOBIUM JAPONICUM ENGINEERING STRAINS BY THE METHOD OF FOREIGN DNA TRANSFER |
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| Miao Lihong Zhou Junchu.CONSTRUCTION AND SCREENING OF BRADYRHIZOBIUM JAPONICUM ENGINEERING STRAINS BY THE METHOD OF FOREIGN DNA TRANSFER[J].Journal of Huazhong Agricultural University,1993,12(3):255-264. |
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| Authors: | Miao Lihong Zhou Junchu |
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| Keywords: | Bradyhizobium japonicum conjugants plasmid |
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