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甜槠ISSR-PCR反应体系的正交优化
引用本文:张文标,金则新,李钧敏,潘冠琼.甜槠ISSR-PCR反应体系的正交优化[J].浙江林学院学报,2006,23(5):516-520.
作者姓名:张文标  金则新  李钧敏  潘冠琼
作者单位:1. 西南师范大学,三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆,400715;台州学院,生态研究所,浙江,临海,317000
2. 台州学院,生态研究所,浙江,临海,317000
摘    要:对甜槠Castanopsis eyrei进行遗传多样性研究的过程中,为了获得清晰可靠、重复性强的ISSR扩增结果,利用正交设计对Mg2 ,dNTP,引物,Taq酶,牛血清蛋白(BSA)和模板DNA等6种因素5个水平进行筛选和优化。确定甜槠ISSR-PCR最适宜反应体系为:10μL反应体积中,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol.L-1Tris-HCl,pH 9.0,50 mmol.L-1KCl,10 g.L-1TritonX-100),1.7 mmol.L-1Mg2 ,0.25 mmol.L-1dNTP,8.34 nkatTaqDNA聚合酶,1.5 g.L-1牛血清白蛋白,6 pmol引物,12 ng模板DNA。甜槠扩增时引物UBC846的最适退火温度为56.3℃。图2表1参23

关 键 词:植物学  正交设计  优化  甜槠
文章编号:1000-5692(2006)05-0516-05
收稿时间:2005-10-31
修稿时间:2006-05-15

Optimization of ISSR-PCR reaction system of Castanopsis eyrei by orthogonal design
ZHANG Wen-biao,JIN Ze-xin,LI Jun-min,PAN Guan-qiong.Optimization of ISSR-PCR reaction system of Castanopsis eyrei by orthogonal design[J].Journal of Zhejiang Forestry College,2006,23(5):516-520.
Authors:ZHANG Wen-biao  JIN Ze-xin  LI Jun-min  PAN Guan-qiong
Abstract:
Keywords:ISSR-PCR
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