| 小白链霉菌武夷变种HWM DNA的制备及最适酶切条件确定 |
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| 引用本文： | 王万群 阿拉坦夫 展丽然 石义萍 张克诚. 小白链霉菌武夷变种HWM DNA的制备及最适酶切条件确定[J]. 中国农业科技导报, 2008, 10(Z1): 116-119 |
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| 作者姓名： | 王万群 阿拉坦夫 展丽然 石义萍 张克诚 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院植物保护研究所 中国农业科学院植物保护研究所 北京 内蒙古师范大学 呼和浩特 河北农业大学 河北保定 |
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| 基金项目： | 公益性行业科研专项项目“生太康复型农田绿色控害技术体系组建与创新”(200803032);; 国家科技术支撑计划项目“重大病虫害生物防治新技术”(2006AD08A02)资助 |
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| 摘 要： | 为构建小白链霉菌武夷变种(Streptomyces albulus var. wuyiensis)的细菌人工染色体(bacterial artificial chromosomes,BAC)文库,提取了小白链霉菌武夷变种高分子量DNA(high molecular weight DNA,HMW-DNA)。用低熔点琼脂糖(low melting point agarose,LMP)包埋小白链霉菌武夷变种菌丝球,胶块经溶菌酶、蛋白酶K、两种限制性内切酶(BamHI、Hind III)处理后,使用箝位匀强电场(CHEF)凝胶电泳检测DNA片段大小。电泳结果显示提取HWM DNA完整,满足构建BAC文库的条件,确定了最适酶切条件为Hind III0.2 U酶切10min,为小白链霉菌武夷变种功能基因的研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 高分子量DNA 细菌人工染色体 箝位匀强电场电泳 |
Preparation of HMW DNA for Streptomyces albulus var. wuyiensis and Determination of the Optimum Conditions for Restriction Enzyme Digestion |
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| WANG Wan-qun|A-la-tan-fu||ZHAN Li-ran||SHI Yi-pin|ZHANG Ke-cheng. Preparation of HMW DNA for Streptomyces albulus var. wuyiensis and Determination of the Optimum Conditions for Restriction Enzyme Digestion[J]. Journal of Agricultural Science and Technology, 2008, 10(Z1): 116-119 |
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| Authors: | WANG Wan-qun|A-la-tan-fu||ZHAN Li-ran||SHI Yi-pin|ZHANG Ke-cheng |
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| Affiliation: | 1.Institute of Plant Protection|Chinese Academy of Agricultural Sciences|Beijing 100094|2.Innermongolia Normal University|Huhhot 010022|3.Agricultural University of Hebei|Hebei Baoding 071001|China |
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| Abstract: | In order to construct bacterial artificial chromosomes library of Streptomyces albulus var.wuyiensis,we extractd high molecular weight DNA(HMW-DNA) from Streptomyces albulus var.wuyiensis.Mycelium pellet of Streptomyces albulus var.wuyiensis was embeded in low melting point agarose.The agarose block was treated by lysozyme,proteinase K and restriction enzyme.Contour-clamped homogeneous electric field(CHEF) gel electrophoresis was performed for prepared DNA plugs.Electrophoresis analysis shows no degradation... |
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| Keywords: | high molecular weight DNA bacterial artificial chromosomes library CHEF gel electrophoresis |
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