猪细环病毒1型衣壳蛋白的原核表达及鉴定 |
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引用本文: | 王俊,陈丙生,杨倩,于红欣,刘芊麟,周双海. 猪细环病毒1型衣壳蛋白的原核表达及鉴定[J]. 北京农学院学报, 2015, 0(4). DOI: 10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2015.0089 |
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作者姓名: | 王俊 陈丙生 杨倩 于红欣 刘芊麟 周双海 |
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作者单位: | 北京农学院动物科学技术学院,北京,102206 |
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摘 要: | 为了制备猪细环病毒1型(TTSuV1)抗体,并为建立TTSuV1免疫学检测方法奠定基础。用PCR技术扩增TTSuV1衣壳蛋白(Cap)基因片段,与载体pET-32a定向连接,构建重组原核表达质粒pET-32a-Cap,转化入大肠杆菌Rosetta(DE3),诱导重组阳性菌表达,SDS-PAGE研究融合蛋白表达情况。对重组融合蛋白进行纯化、复性后,免疫BALB/c小鼠4次来制备鼠抗TTSuV1-Cap蛋白抗体。分别以鼠抗TTSuV1-Cap蛋白抗体和TTSuV1猪阳性血清为一抗,对重组融合蛋白进行免疫印迹检测。结果显示,成功表达了TTSuV1Cap截短体融合蛋白,表达产物以包涵体形式存在,重组蛋白可与鼠抗TTSuV1-Cap蛋白抗体及TTSuV1猪阳性血清发生特异性结合,表明表达的TTSuV1-Cap融合蛋白具有良好的免疫原性和反应原性。
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关 键 词: | 猪细环病毒1型 衣壳蛋白 原核表达 |
Prokaryotic expression and identification of capsid protein of Torqueteno sus virus type 1 |
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Abstract: | |
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Keywords: | Torque teno sus virus type 1 Cap protein prokaryotic expression |
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