| 接种PRSV番木瓜种苗胞质酵母双杂交cDNA文库的构建与分析 |
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| 引用本文： | 沈文涛,周鹏.接种PRSV番木瓜种苗胞质酵母双杂交cDNA文库的构建与分析[J].热带作物学报,2008,29(4):419-423. |
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| 作者姓名： | 沈文涛 周鹏 |
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| 作者单位： | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海口,571101 |
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| 基金项目： | 中央级科研院所基本科研业务费项目 |
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| 摘 要： | 利用Trizol法提取接种PRsv 4 d的番木瓜种苗总RNA,分离纯化mRNA,反转录合成双链cDNA,双链cDNA末端经Pfu-DNA聚合酶补平,与EcoR I接头连接,XhoI酶切消化产生粘端.用Sepharose CL-2B柱分离纯化去除小分子cDNA片段,再与pMyr酵母表达载体连接,转化受体菌XL10-Gold,构建了接种PRSV番木瓜种苗胞质酵母双杂交cDNA文库.所获得的原始文库的克隆总数为1.8×106cfu,重组率为100%,文库滴度为2.6×109cfu/mL.对随机选取的34个克隆进行PCR鉴定,结果表明插入片段长度均大于O.5 kb且集中在1 kb左右.文库质量鉴定结果表明,该文库具有较好的库容量、较高的重组率以及较大的插入片段.
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| 关 键 词： | 番木瓜 cDNA文库 酵母双杂交系统 |
Construction and Primary Analysis of Yeast Cytoplasmic Two-hybrid cDNA Library of Carica papaya Seedlings Inoculated with Papaya Ringspot Virus |
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| Shen Wentao and Zhou Peng.Construction and Primary Analysis of Yeast Cytoplasmic Two-hybrid cDNA Library of Carica papaya Seedlings Inoculated with Papaya Ringspot Virus[J].Chinese Journal of Tropical Crops,2008,29(4):419-423. |
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| Authors: | Shen Wentao and Zhou Peng |
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| Institution: | Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology,CATAS,Haikou,Hainan,571101,China;Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology,CATAS,Haikou,Hainan,571101,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PRSV |
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