钝吻黄盖鲽精子冷冻保存及生理特性分析 |
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引用本文: | 宋莉妮,田永胜,李祥孔,李洪,孙宗哲,陈张帆,李军,刘清华,陈松林. 钝吻黄盖鲽精子冷冻保存及生理特性分析[J]. 农业生物技术学报, 2016, 0(4): 584-592. DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2016.04.013 |
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作者姓名: | 宋莉妮 田永胜 李祥孔 李洪 孙宗哲 陈张帆 李军 刘清华 陈松林 |
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作者单位: | 1. 中国水产科学院黄海水产研究所农业部海洋渔业可持续发展重点实验室,青岛266071;上海海洋大学水产与生命学院,上海201306;2. 中国水产科学院黄海水产研究所农业部海洋渔业可持续发展重点实验室,青岛,266071;3. 大连海洋大学水产与生命学院,大连,116023;4. 蓬莱市宗哲水产养殖公司,蓬莱,265617;5. 中国科学院海洋研究所,青岛,266000 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863)项目(No.2012AA10A402) |
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摘 要: | 钝吻黄盖鲽(Pseudopleuronectes yokohamae)是鲆鲽鱼类中重要的天然捕捞和养殖对象,但由于生态环境变化、人工捕捞过度等因素,导致其种质资源数量降低,进行精子冷冻保存技术研究,对其种质资源保存具有重要意义.本研究以性成熟的雄性钝吻黄盖鲽为实验材料,对精子稀释液种类及成分、抗冻剂种类、激活精子海水盐度和冷冻精液授精实验等进行筛选,实验数据利用SPSS 19.0软件进行单因素方差分析和Student-Newman-Keuls分析.结果表明,利用MFs-3(8 g/L NaCl+0.65 g/L KCl+15 g/L Glucose)稀释液分别与20%1,2丙二醇(1,2-propylene glycol,PG)和20%乙二醇(ethylene glycol,EG)抗冻剂作为精子抗冻保存液时,冷冻效果最好,其中PG组对应的精子活力、快速运动时间和寿命分别为(95.26±0.39)%、(46.00±1.00)s和(124.33±4.04)s,EG组则为(95.15±0.41)%、(45.67±0.58)s和(124.00±3.00)s.利用盐度为10~50的人工配制的海水激活解冻后的精子,发现当盐度为30时,精子活力高达(95.07±0.69)%,与对照组相比不存在显著性差异.将PG组和EG组冷冻保存的精子解冻后分别与其卵进行授精实验,PG组受精率和孵化率为(80.08±0.68)%和(77.44±1.76)%,EG组则为(80.17±0.45)%和(77.92±1.33)%,与鲜精相比无显著性差异.利用计算机辅助精子分析系统(computer-aided sperm analysis,CASA)测定MFs-3+20% PG和MFs-3+20% EG冷冻保存的钝吻黄盖鲽精子的各项运动参数,结果显示,二者的曲线运动速度(curvilinear velocity,VCL)、直线运动速度(straight line velocity,VSL)、平均鞭打频率(beat cross frequency,BCF)、运动的直线性(linearity,LIN)和运动的前向性(straightness,STR)的数值差异性不显著.本研究利用MFs-3+20% PG和MFs-3+20% EG成功冷冻了钝吻黄盖鲽的精子,为钝吻黄盖鲽精子冷冻保存技术、人工杂交育种繁殖及种质资源库的建立奠定了基础.
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关 键 词: | 钝吻黄盖鲽 精子 冷冻保存 |
Cryopreservation of Marbled Flounder (Pseudopleuronectes yokohamae)Sperm and Analysis of Its Physiological Characteristics |
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Abstract: | |
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Keywords: | Pseudopleuronectes yokohamae Sperm Cryopreservation |
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