| UTX与JMJD3体外转录载体构建及其在小鼠卵母细胞上的验证 |
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| 引用本文： | 杨磊,宋丽爽,刘雪霏,白力格,李光鹏. UTX与JMJD3体外转录载体构建及其在小鼠卵母细胞上的验证[J]. 农业生物技术学报, 2016, 0(8): 1267-1277. DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2016.08.019 |
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| 作者姓名： | 杨磊 宋丽爽 刘雪霏 白力格 李光鹏 |
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| 作者单位： | 内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室,呼和浩特,010021 |
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| 基金项目： | 转基因生物新品种培育科技重大专项(No.2014ZX08007-002) |
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| 摘 要： | UTX(ubiquitously transcribed tetratricopeptide repeat X chromosome)和JMJD3(jumonji domain containing 3)是组蛋白H3赖氨酸27位三甲基化(histone H3 lysine 27 trimethylation,H3K27me3)去甲基化酶,可以调控动物机体生长、肌肉发育、调节代谢等重要生理功能.本研究根据小鼠(Mus musculus)UTX和JMJD3 mRNA序列设计3对引物,分别构建了体外转录载体pMD19T-T7UTX和pMD19T-T7JMJD3.分别将体外转录mRNA注射进小鼠卵母细胞,并利用免疫荧光方法对H3K27me3进行检测.转录产物经电泳检测,结果显示,UTX与JMJD3条带清晰与预期大小相符;通过显微注射mRNA的卵母细胞,其H3K27三甲基化修饰明显减少.本研究成功构建了UTX与JMJD3体外转录载体,并在细胞水平证明转录产物能够翻译出具有活性的酶,为利用此载体研究UTX与JMJD3在生长发育及相关疾病发生中的机制提供基础资料.
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| 关 键 词： | UTX JMJD3 组蛋白H3赖氨酸27位三甲基化(H3K27me3) 体外转录 显微注射 卵母细胞 |
Construction of UTX and JMJD3 In vitro Transcription Vector and Its Validation on Mouse (Mus musculus)Oocytes |
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