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普通小麦TaSEC14p-5基因的克隆及表达分析
引用本文:苏世超,唐益苗,徐磊,王伟伟,高世庆,马锦绣,孙辉,王永波,乔亚科.普通小麦TaSEC14p-5基因的克隆及表达分析[J].农业生物技术学报,2016(8):1129-1137.
作者姓名:苏世超  唐益苗  徐磊  王伟伟  高世庆  马锦绣  孙辉  王永波  乔亚科
作者单位:1. 河北科技师范学院生命科技学院,昌黎066600;北京市农林科学院杂交小麦工程技术研究中心,北京100097;2. 河北科技师范学院生命科技学院,昌黎066600;北京市农林科学院杂交小麦工程技术研究中心,北京100097;首都师范大学生命科学院,北京100048;3. 北京市农林科学院杂交小麦工程技术研究中心,北京100097;首都师范大学生命科学院,北京100048;4. 北京市农林科学院杂交小麦工程技术研究中心,北京,100097;5. 河北科技师范学院生命科技学院,昌黎,066600
基金项目:北京市农林科学院科技创新能力建设专项(No.KJCX20140202)、国家自然科学基金(No.31571744)和北京市农林科学院青年基金(No.QNJJ201307)
摘    要:磷脂酰肌醇转运蛋白Sec14是最先在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中发现的磷脂酰肌醇转运蛋白,含有一个典型的SEC14保守结构域.S0ec14p磷脂酰肌醇转运蛋白广泛存在于真核生物细胞中,并参与膜运输途径、质膜发育、脂肪酸代谢、根毛的生长等生命活动,但未见此蛋白在作物逆境胁迫的有关报道.为研究Sec14p基因在小麦(Triticum aestivum)发育及逆境胁迫中的功能,本研究采用电子克隆方法从小麦京花9号中得到一个Sec14p基因,命名为TaSEC14p-5 (GenBank登录号:KU639968).氨基酸序列分析表明,该基因ORF全长为984 bp,编码327个氨基酸,相对分子质量为37.1 kD,理论等电点为7.70.在植物中该蛋白有典型的SEC14类基因家族保守域SEC14和一个CRAL_TRIO_N结构域.进化和聚类分析表明,小麦TaSEC14p-5基因与粗山羊草(Aegilops tauschii)磷脂酰肌醇转运蛋白AeSEC14p基因和水稻(Oryza sativa)磷脂酰肌醇转运蛋白Os02g0200000基因亲缘关系较近,蛋白相似度分别为96.45%和88.38%.采用qRT-PCR技术,对小麦孕穗期不同组织和不同非生物胁迫幼苗进行表达分析.发现该基因在根、茎、叶、颖壳、雄蕊和种子中均有表达,且在茎中表达量较高,雄蕊次之,根最低;该基因受高盐的强烈诱导,同时也受到脱落酸(abscisic acid,ABA) (200μmol/L)、干旱(PEG6000)和低温(4℃)不同程度的胁迫诱导.TaSEC14p-5在NaC1、ABA、PEG和4 ℃四种不同胁迫处理下,总体趋势为先上升后下降.结果推测,TaSEC14p-5基因可能参与了NaC1、ABA、PEG6000和4℃等不同程度的非生物胁迫处理,为进一步改良小麦抗逆性等分子机理研究提供了新的依据.

关 键 词:小麦  TaSEC14p-5  序列分析  非生物胁迫  qRT-PCR

Cloning and Expression Analysis of TaSEC14p-5 Gene from Wheat (Triticum aestivum)
Abstract:
Keywords:Wheat  TaSEC14p-5  Sequence analysis  Abiotic stress  qRT-PCR
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