| 超表达细胞周期蛋白A2基因(CycA2)抑制猪卵母细胞PB1体外排出 |
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| 引用本文： | 陈瑞,余博,李科瑛,雷安民. 超表达细胞周期蛋白A2基因(CycA2)抑制猪卵母细胞PB1体外排出[J]. 农业生物技术学报, 2016, 0(9): 1420-1428. DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2016.09.016 |
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| 作者姓名： | 陈瑞 余博 李科瑛 雷安民 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学动物医学院/陕西省干细胞工程技术研究中心,杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.31172280) |
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| 摘 要： | 在卵母细胞成熟过程中,细胞周期蛋白A2(CyclinA2,CycA2)可与不同周期蛋白依赖激酶(cyclindependent kinase,CDK)相互作用,通过其周期性表达和降解,参与调控细胞周期.为探讨CycA2基因对猪(Sus scrofa)卵母细胞体外成熟的影响,本研究从猪卵巢中克隆CycA2基因,构建野生型pVenus-CycA2和非降解型pVenus-DN157CycA2真核表达载体,转染至hela细胞,确认重组质粒的表达及定位情况.将pVenus-CycA2、pVenus-DN157CycA2体外转录为cRNA,对猪卵母细胞进行显微注射后,体外成熟培养一段时间后统计第一极体排出率,并观察其表达和定位.结果显示,显微注射了pVenus-CycA2、pVenusDN 157CycA2cRNA的卵母细胞,其第一极体(first polar body,PBl)的排出率与对照组相比极其显著降低(P＜0.001,);用Roscovitine处理的pVenus-DN 157CycA2表达的卵可恢复排出PB1的能力,其PB1排出率与对照组相比差异不显著.本研究首次揭示了CycA2基因对猪卵母细胞体外成熟过程的影响,为探索CycA2参与染色体分离调控的分子机制提供理论依据,同时也为进一步研究第二次减数分裂过程中CycA2基因的作用提供了一个平台.
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| 关 键 词： | 猪卵母细胞 细胞周期蛋白A2(CycA2) 体外转录 显微注射 成熟培养 |
CyclinA2 Gene (CycA2) Over-expression Blocks Extrusion of Porcine(Sus scrofa) Oocytes PB1 In vitro |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Porcine oocytes CyclinA2 (CycA2) Transcription in vitro Microinjection Maturation culture |
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