| 毛囊特异表达载体pUHS-FGF18的构建及转基因小鼠的制备 |
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| 引用本文： | 李欣欣,奥旭东,李东芳,魏著英,银凤霞,杨磊,李光鹏. 毛囊特异表达载体pUHS-FGF18的构建及转基因小鼠的制备[J]. 农业生物技术学报, 2016, 0(8): 1165-1172. DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2016.08.007 |
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| 作者姓名： | 李欣欣 奥旭东 李东芳 魏著英 银凤霞 杨磊 李光鹏 |
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| 作者单位： | 内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室,呼和浩特,010070 |
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| 基金项目： | 转基因生物新品种培育科技重大专项(No.2014ZX08007-002) |
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| 摘 要： | 成纤维生长因子18(fibroblast growth factor 18,Fgf18)是一种分泌型的信号分子,参与小鼠(Mus musculus)和绒山羊(Capra hircus)毛发生长及毛周期的调控.本研究克隆了小鼠Fgf18基因CDS区的片段,并将其连接于超高硫角蛋白(ultra-high sulfur keratin,UHS)启动子的下游.Sac Ⅰ、BglⅡ、SphⅠ和EcoT14 Ⅰ的酶切鉴定结果表明,成功构建了Fgf18基因毛囊特异表达载体pUHS-Fgf18.原核注射线性化pUHS-FGF18,共获得3只转基因小鼠.RT-PCR检测结果表明,Fgf18基因在转基因小鼠皮肤中的表达明显高于对照小鼠(P＜0.05).转基因小鼠NO.205皮肤中Fgf18的表达量明显高于对照小鼠(P＜0.05),而肝脏、肾脏、心脏、睾丸、骨骼肌、脾、脑、肺、胃和小肠等组织则与对照小鼠无显著性差异(P＞0.05).Westem blot的结果表明,转基因小鼠皮肤的Fgf18蛋白水平显著高于对照组(P＜0.05).同时本研究利用RT-PCR的方法检测了转基因小鼠中Fgf18基因的拷贝数,其拷贝数在8～210.本研究成功建立了毛囊特异表达Fgf18基因的转基因小鼠模型,不仅可为进一步研究Fgf18基因在毛周期及毛发生长中的功能及其作用机理提供必要的工具和手段,也可为生产Fgf18基因修饰的转基因绒山羊提供一定的理论基础.
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| 关 键 词： | 成纤维生长因子18 (Fgf18) 毛囊 组织特异性 超高硫角蛋白(UHS) 转基因小鼠 |
Construction of the Follicle-specific Expression Vector for Fgf18 and Production of Transgenic Mouse (Mus musculus) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Fibroblast growth factor 18(Fgf18) Hair follicle Tissue specificity Ultra-high sulfur keratin (UHS) Transgenic mice |
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