利用SOE-PCR与TD-PCR技术对气肿疽梭菌FliA(C)-NanA融合基因扩增方法的构建 |
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引用本文: | 李香春,金鑫,朴春宇,金成德,朴春实.利用SOE-PCR与TD-PCR技术对气肿疽梭菌FliA(C)-NanA融合基因扩增方法的构建[J].安徽农业科学,2013(24):9921-9923. |
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作者姓名: | 李香春 金鑫 朴春宇 金成德 朴春实 |
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作者单位: | [1]延边大学农学院动物医学系,吉林延吉133000 [2]延吉市动物卫生检疫站,吉林延吉133000 [3]吉林省晖春畜牧管理局,吉林晖春133000 [4]吉林省珲春市动物卫生监督所,吉林晖春133300 |
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摘 要: | 目的]构建联合表达气肿疽梭菌的鞭毛蛋白与分泌蛋白神经氨酸酶的方法,用以制备气肿疽生物工程亚单位疫苗.方法]根据已公布的气肿疽梭菌FliA(C)和NanA序列设计引物,联合使用SOE-PCR与TD-PCR技术,建立融合基因FliA(C)-NanA的扩增方法.结果]试验成功扩增出了融合基因FliA(C)-NanA.结论]SOE-PCR方法无需在引物设计中加入酶切位点进行连接,降低了试验成本,且2个基因间未加入其他核酸序列,避免了表达出影响免疫效果的蛋白;TD-PCR的应用节省了试验时间,避免了筛选退火温度的繁琐步骤,解决了基因丢失的问题.
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关 键 词: | 气肿疽梭菌 融合基因 SOE-PCR TD-PCR |
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