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利用SOE-PCR与TD-PCR技术对气肿疽梭菌FliA(C)-NanA融合基因扩增方法的构建
引用本文:李香春,金鑫,朴春宇,金成德,朴春实.利用SOE-PCR与TD-PCR技术对气肿疽梭菌FliA(C)-NanA融合基因扩增方法的构建[J].安徽农业科学,2013(24):9921-9923.
作者姓名:李香春  金鑫  朴春宇  金成德  朴春实
作者单位:[1]延边大学农学院动物医学系,吉林延吉133000 [2]延吉市动物卫生检疫站,吉林延吉133000 [3]吉林省晖春畜牧管理局,吉林晖春133000 [4]吉林省珲春市动物卫生监督所,吉林晖春133300
摘    要:目的]构建联合表达气肿疽梭菌的鞭毛蛋白与分泌蛋白神经氨酸酶的方法,用以制备气肿疽生物工程亚单位疫苗.方法]根据已公布的气肿疽梭菌FliA(C)和NanA序列设计引物,联合使用SOE-PCR与TD-PCR技术,建立融合基因FliA(C)-NanA的扩增方法.结果]试验成功扩增出了融合基因FliA(C)-NanA.结论]SOE-PCR方法无需在引物设计中加入酶切位点进行连接,降低了试验成本,且2个基因间未加入其他核酸序列,避免了表达出影响免疫效果的蛋白;TD-PCR的应用节省了试验时间,避免了筛选退火温度的繁琐步骤,解决了基因丢失的问题.

关 键 词:气肿疽梭菌  融合基因  SOE-PCR  TD-PCR
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