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| 马传染性贫血病毒弱毒株LTR点突变型嵌合感染性克隆的构建 | |
| 引用本文： | 左咏梅,吕晓玲,赵立平,李庆章,郝艳红,沈荣显,相文华,王晓钧.马传染性贫血病毒弱毒株LTR点突变型嵌合感染性克隆的构建[J].中国预防兽医学报,2007,29(8):569-574. |
| 作者姓名： | 左咏梅 吕晓玲 赵立平 李庆章 郝艳红 沈荣显 相文华 王晓钧 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001;东北农业大学,黑龙江,哈尔滨,150030 2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001 3. 东北农业大学,黑龙江,哈尔滨,150030 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金;国家重点基础研究发展规划(973计划)前期研究专项基金 |
| 摘 要： | 马传染性贫血病毒（Equine infectious anemia virus,EIAV）长末端重复序列（Long terminal repeat,LTR）是基因组中高度变异区之一,EIAV LTR的变异对于指导病毒的复制和病毒致病性具有重要的生物学意义。为了阐明我国马传染性贫血病毒弱毒疫苗毒力致弱的分子机制,由马传贫强毒至弱毒致弱过程中不同代次毒株LTR序列的分析,以驴胎皮肤弱毒株疫苗全长感染性克隆pLGFD3-8为父本,选取LTR R区的TAR起始碱基,poly（A）附加位点,采用反向遗传操作对其位点进行PCR体外定点突变,将弱毒序列构建的逆向点突变型全基因克隆转染到驴胎皮肤细胞（FDD）并在FDD上传代,通过逆转录酶活性（RT）检测、RT-PCR方法及real-time RT PCR检测并验证其感染性。检测结果为构建的逆向点突变型感染性克隆在FDD上被拯救,其衍生病毒感染的FDD上出现明显的细胞病变;细胞培养上清可检测到RT酶活性和RT-PCR阳性;电镜下可见大量典型的EIAV颗粒pLGFD-M点突变型嵌合克隆衍生病毒与其父本克隆衍生病毒pLGFD3-8复制水平相似。此结果为进一步深入研究LTR对马传染性贫血病毒复制水平和毒力的影响奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 马传染性贫血病毒 定点突变 嵌合病毒 |
| 文章编号： | 1008-0589（2007）08-0569-06 |
| 修稿时间： | 2006-12-06 |
Construction of a chimeric clone of Chinese equine infectious anemia virus by site-mutation in the LTR region |
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| ZUO Yong-mei,LV Xiao-ling,ZHAO Li-ping,LI Qing-zhang,HAO Yan-hong,SHEN Rong-xian,XIANG Wen-hua,WANG Xiao-jun.Construction of a chimeric clone of Chinese equine infectious anemia virus by site-mutation in the LTR region[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2007,29(8):569-574. | |
| Authors: | ZUO Yong-mei LV Xiao-ling ZHAO Li-ping LI Qing-zhang HAO Yan-hong SHEN Rong-xian XIANG Wen-hua WANG Xiao-jun |
| Institution: | 1. Division of Livestock Infectious Diseases, National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology, Harbin Veterinary Research Institute of Chinese Academy of Agricultural Sciences, Harbin 150001, China; 2. Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | equine infectious anemia virus the sited-direct mutation chimeric virus |
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