绵羊γ干扰素在家蚕杆状病毒表达系统中的表达及产物的抗病毒活性 |
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引用本文: | 邵丽萍,吕言娜,杨鑫,赵泽,胡小元,李轶女,张志芳,易咏竹.绵羊γ干扰素在家蚕杆状病毒表达系统中的表达及产物的抗病毒活性[J].蚕业科学,2017,43(5):809-815. |
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作者姓名: | 邵丽萍 吕言娜 杨鑫 赵泽 胡小元 李轶女 张志芳 易咏竹 |
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作者单位: | 江苏科技大学生物技术学院,江苏镇江,212018;中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081 |
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基金项目: | 国家重点研发计划;国家自然科学基金 |
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摘 要: | 干扰素(IFN)具有广谱的抗病毒作用,利用杆状病毒表达系统安全、高效和后加工过程完整的特点,在家蚕体内表达生产重组绵羊γ干扰素(Ovi IFN-γ)。依据家蚕的密码子偏好性对Ovi IFN-γ基因核苷酸序列进行优化和PCR,并克隆了带有His标签编码序列的Ovi IFN-γ基因序列Ovi IFN-His-Tagged-γ,构建分别插入Ovi IFN-γ和Ovi IFN-His-Tagged-γ基因的重组病毒。将2种重组病毒感染家蚕5龄幼虫,Western blot检测蚕体血淋巴中重组Ovi IFN-γ和Ovi IFN-His-Tagged-γ成功表达。采用细胞病变抑制法测定蚕体血淋巴中重组Ovi IFN-γ的效价为1.6×106U/m L,重组Ovi IFN-His-Tagged-γ的效价为2.8×105U/m L,前者的抗病毒活性强于后者,稀释至2.0×104倍时,能够完全抑制VSV-GFP病毒感染。上述结果为利用家蚕杆状病毒表达系统在蚕体内高效、安全生产具有抗病毒活性的重组绵羊γ干扰素提供了试验依据。
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关 键 词: | 绵羊γ干扰素 杆状病毒表达系统 家蚕幼虫 重组蛋白 抗病毒活性 |
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