| 牛溶血性曼氏杆菌可视化LAMP检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 刘宁宁,易萍,郭爱珍,胡长敏,陈颖钰.牛溶血性曼氏杆菌可视化LAMP检测方法的建立[J].华中农业大学学报,2023,42(2):32-37. |
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| 作者姓名： | 刘宁宁 易萍 郭爱珍 胡长敏 陈颖钰 |
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| 作者单位： | 1.华中农业大学动物医学院/农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室,武汉 430070;2.湖北省兽医流行病学国际科技合作基地,武汉 430070;3.湖北洪山实验室, 武汉 430070 |
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| 基金项目： | 湖北省重点研发计划项目（2020BBA055）；宁夏回族自治区重点研发计划项目（2021BEF02028）；国家现代农业（肉牛/牦牛）产业技术体系专项（CARS-37） |
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| 摘 要： | 为建立一种能够快速、高效检测牛溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica)的可视化LAMP检测法，利用LAMP引物设计软件，以溶血性曼氏杆菌保守基因lktC序列设计内引物、外引物及环引物，对其反应温度、Mg2+浓度、dNTPs浓度等条件进行优化，并检测了方法的敏感性、特异性及实用性。结果显示，该方法在68.2℃、6 mmol/L Mg2+、1.6 mmol/L dNTPs条件下达到最佳，40 min内完成检测并可通过肉眼判定结果，对细菌的最低检测限为6.7×10-1 cfu/μL，对lktC重组质粒的最低检测限为7.9×102 copies/μL，敏感性高；与15种病原均不发生交叉反应，特异性好；对背景清晰小鼠肺组织样本检测结果显示该方法实用性良好，且优于普通PCR方法。表明该方法可快速、高效检测牛溶血性曼氏杆菌。
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| 关 键 词： | 环介导等温扩增(LAMP) lktC基因 溶血性曼氏杆菌 可视化检测 综合防控 |
| 收稿时间： | 2022/10/11 0:00:00 |
Establishment of visual LAMP method for detecting Mannheimia haemolytica in cattle |
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| LIU Ningning,YI Ping,GUO Aizhen,HU Changmin,CHEN Yingyu.Establishment of visual LAMP method for detecting Mannheimia haemolytica in cattle[J].Journal of Huazhong Agricultural University,2023,42(2):32-37. |
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| Authors: | LIU Ningning YI Ping GUO Aizhen HU Changmin CHEN Yingyu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | loop-mediated isothermal amplification lktC gene Mannheimia haemolytica visualization detection comprehensive prevention and control |
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