| 重组微线体MIC10的牛弓形虫抗体间接ELISA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 李筱鑫,王泽东,刘全,葛巍,王巍,魏峰. 重组微线体MIC10的牛弓形虫抗体间接ELISA检测方法的建立[J]. 中国兽医学报, 2015, 0(3): 425-428 |
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| 作者姓名： | 李筱鑫 王泽东 刘全 葛巍 王巍 魏峰 |
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| 作者单位： | 吉林农业大学生命科学学院;军事医学科学院军事兽医研究所/吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室 |
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| 基金项目： | 公益性行业(农业)科研专项资助项目(201303042) |
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| 摘 要： | 为建立牛弓形虫抗体间接ELISA检测方法,根据弓形虫MIC10基因序列设计合成引物,应用PCR技术扩增MIC10基因,将其克隆至pET-22b载体,构建重组质粒pET-22b-MIC10,将其转化至E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导,SDS-PAGE及Western-blot分析表明,该重组蛋白能与弓形虫阳性血清发生特异性反应。重组蛋白经NiNTA纯化,应用牛弓形虫阳性、阴性血清建立了ELISA检测方法,抗原最佳包被质量浓度为5mg/L,二抗稀释倍数为1∶20 000,封闭液为含5%脱脂奶粉的PBST溶液。该方法重复性好、特异性强、敏感性高,为牛弓形虫流行病学调查奠定基础。
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| 关 键 词： | 弓形虫 MIC10 间接ELISA 牛 |
Development of an indirect ELISA for detecting Toxoplasma gondii infection in cattle based on prokaryotically expressed MIC10 |
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| LI Xiao-xin;WANG Ze-dong;LIU Quan;GE Wei;WANG Wei;WEI Feng. Development of an indirect ELISA for detecting Toxoplasma gondii infection in cattle based on prokaryotically expressed MIC10[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2015, 0(3): 425-428 |
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| Authors: | LI Xiao-xin WANG Ze-dong LIU Quan GE Wei WANG Wei WEI Feng |
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| Affiliation: | LI Xiao-xin;WANG Ze-dong;LIU Quan;GE Wei;WANG Wei;WEI Feng;College of Life Science,Jilin Agricultural University;Key Laboratory of Jilin Province for Zoonosis Prevention and Control,Institute of Military Veterinary,Academy of Military Medical Sciences; |
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