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新城疫病毒逆转录环介导等温扩增检测方法的建立
引用本文:杜景娇,薛强,邹明强,滕文锋,郭浩,但晓雅.新城疫病毒逆转录环介导等温扩增检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2011,33(12).
作者姓名:杜景娇  薛强  邹明强  滕文锋  郭浩  但晓雅
作者单位:1. 中国检验检疫科学研究院,北京 100123;大连医科大学,辽宁 大连 116044
2. 中国检验检疫科学研究院,北京,100123
3. 大连医科大学,辽宁 大连,116044
4. 中国检验检疫科学研究院,北京 100123;内蒙古医学院,内蒙古 呼和浩特 010059
5. 中国检验检疫科学研究院,北京 100123;江苏大学,江苏 镇江 212013
基金项目:国际科技合作项目,国家十一五科技支撑计划
摘    要:为建立一种新城疫病毒(NDV)的简便、快速、高灵敏度的检测方法,本研究根据NDV融合蛋白基因(F基因)设计合成6条特异性引物,在恒温水浴中进行核酸扩增反应,对反应温度、反应时间以及反应液中Mg2+浓度进行优化,获得最佳反应条件,结果经凝胶电泳分析并在可见光下直接观察.整个RT-LAMP检测用时0.5 h,检测敏感度比RT-PCR高100倍,对禽流感病毒、鸡传染性支气管炎病毒和鸡传染性喉气管炎病毒无交叉反应.本研究建立的NDV RT-LAMP检测方法速度快、不需要高精密的仪器,而且具有灵敏度高、特异性强,操作简单等特点,有望在核酸扩增检测方法中取代RT-PCR技术.

关 键 词:新城疫病毒  环介导逆转录等温扩增技术  融合基因(F基因)
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