新城疫病毒逆转录环介导等温扩增检测方法的建立 |
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引用本文: | 杜景娇,薛强,邹明强,滕文锋,郭浩,但晓雅.新城疫病毒逆转录环介导等温扩增检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2011,33(12). |
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作者姓名: | 杜景娇 薛强 邹明强 滕文锋 郭浩 但晓雅 |
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作者单位: | 1. 中国检验检疫科学研究院,北京 100123;大连医科大学,辽宁 大连 116044 2. 中国检验检疫科学研究院,北京,100123 3. 大连医科大学,辽宁 大连,116044 4. 中国检验检疫科学研究院,北京 100123;内蒙古医学院,内蒙古 呼和浩特 010059 5. 中国检验检疫科学研究院,北京 100123;江苏大学,江苏 镇江 212013 |
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基金项目: | 国际科技合作项目,国家十一五科技支撑计划 |
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摘 要: | 为建立一种新城疫病毒(NDV)的简便、快速、高灵敏度的检测方法,本研究根据NDV融合蛋白基因(F基因)设计合成6条特异性引物,在恒温水浴中进行核酸扩增反应,对反应温度、反应时间以及反应液中Mg2+浓度进行优化,获得最佳反应条件,结果经凝胶电泳分析并在可见光下直接观察.整个RT-LAMP检测用时0.5 h,检测敏感度比RT-PCR高100倍,对禽流感病毒、鸡传染性支气管炎病毒和鸡传染性喉气管炎病毒无交叉反应.本研究建立的NDV RT-LAMP检测方法速度快、不需要高精密的仪器,而且具有灵敏度高、特异性强,操作简单等特点,有望在核酸扩增检测方法中取代RT-PCR技术.
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关 键 词: | 新城疫病毒 环介导逆转录等温扩增技术 融合基因(F基因) |
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