| 牛病毒性腹泻病毒多表位基因疫苗的构建及其免疫效果评价 |
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| 引用本文： | 赵微,张东超,陈婷,何敬文,扈立伟,任君,卢宝平,刘青,包利霞,顾天越,金天明.牛病毒性腹泻病毒多表位基因疫苗的构建及其免疫效果评价[J].畜牧与兽医,2022(10):102-110. |
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| 作者姓名： | 赵微 张东超 陈婷 何敬文 扈立伟 任君 卢宝平 刘青 包利霞 顾天越 金天明 |
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| 作者单位： | 1. 天津农学院动物科学与动物医学学院;2. 天津市农业科学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31572492)；;天津市科技支撑项目(19ZXBTSN00250)；;天津市研究生科研创新项目(2021YJSS137)； |
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| 摘 要： | 旨在构建牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus, BVDV)多表位基因与BVDV结构蛋白E0、E2基因的表达载体并检测其免疫效果。从NCBI上获得BVDV的4种具有免疫原性的结构蛋白C、E0、E2、NS3基因序列，利用生物学方法预测其B、T细胞表位；将获得的序列进行连接，重组获得新肽段(命名为AKK),通过生物学在线软件分析AKK序列的二级结构、亲水性、抗原性、三级结构；PCR分别扩增上述基因序列，构建重组表达载体GV658-AKK-E0-E2、GV658-AKK、GV658-E0、GV658-E2,并将上述构建成功的无内毒素重组质粒转染至MDBK细胞，通过蛋白免疫印迹。经PCR扩增获得2 910、1 170、951和729 bp大小的目的条带，与预计相符；经蛋白免疫印迹验证，在34和68 kDa处有AKK蛋白及E0-E2蛋白的融合表达；经流式细胞术验证显示，在CD3+、CD4+细胞占比上，共表达组极显著高于PBS组，显著高于E0组，与ELISA检测IgG抗体水平结果一致。研究表明，试验成功设计了BVDV多表...
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| 关 键 词： | BVDV 表位预测 E0基因 E2基因 |
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