独一味基因表达SYBR Green I 荧光定量
PCR检测方法的建立 |
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引用本文: | 杨晓丽,罗桂花,陈志,乔枫.独一味基因表达SYBR Green I 荧光定量
PCR检测方法的建立[J].广东农业科学,2014,41(12):133-137. |
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作者姓名: | 杨晓丽 罗桂花 陈志 乔枫 |
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作者单位: | 青海师范大学生命与地理科学学院/青藏高原资源与环境教育部重点实验室,青海西宁810008 |
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基金项目: | 教育部春晖计划项目(Z2010076) |
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摘 要: | 为了建立一种检测独一味mRNA 表达水平的SYBR Green I 荧光定量Real-Time PCR 方法。根据独一
味查尔酮合成酶(LrCHS)和苯丙氨酸解氨酶(LrPAL)基因序列设计特异性引物,运用Real-Time RT-PCR 方法建立
独一味基因的荧光定量标准曲线,进一步研究独一味CHS 和PAL 基因在不同组织中的表达。结果显示,扩增曲线在
1伊105耀1伊1011 copies/滋L 范围内有很好的线性关系,扩增相关系数在0.995 以上。熔解曲线分析表明,产物为特异单
峰,无引物二聚体,具有较高的特异性和灵敏度。独一味CHS 基因在不同组织中表达量顺序为花>叶>叶柄>根>茎,
PAL 基因表达量顺序为叶柄>叶>花>根>茎。建立的检测方法能够成功用于独一味CHS 和PAL 基因表达的检测,为
研究独一味在mRNA 水平的定量分析提供技术平台。
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关 键 词: | 独一味 SYBR Green I 荧光定量RT-PCR CHS PAL |
Establishment of a real-time PCR assay based on
SYBR green I for detection of the gene expression
of Lamiophlomis rotate (Benth.) |
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Abstract: | |
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Keywords: | Lamiophlomis rotate (Benth ) SYBR green I real-time PCR CHS PAL |
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