| 大鲵柱状黄杆菌SYBR Green I 荧光定量PCR 诊断试剂盒的研制 |
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| 引用本文： | 余波,罗永成,徐景峨,周思旋,杨莉,马永兵. 大鲵柱状黄杆菌SYBR Green I 荧光定量PCR 诊断试剂盒的研制[J]. 广东农业科学, 2014, 41(21): 144-148 |
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| 作者姓名： | 余波 罗永成 徐景峨 周思旋 杨莉 马永兵 |
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| 作者单位： | 贵州省畜牧兽医研究所；贵州省水产技术推广站；贵阳市水产技术推广站 |
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| 基金项目： | 贵州省科技厅农业攻关项目（黔科合NZ 字[2012]3023 号）；2014 年省级财政渔业发展（大鲵产业）专项资金 |
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| 摘 要： | 根据GenBank中柱状黄杆菌16SrRNA 序列，设计1对特异性引物，PCR 扩增获得16SrRNA 基因片段，并克隆到pMD-18T载体上作为阳性标准品。通过对SYBR Green I荧光定量PCR反应条件的优化，建立了黄杆菌的SYBR Green I荧光定量PCR 诊断方法，以此为基础研制试剂盒。试剂盒扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰，无引物二聚体，对嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌、迟缓爱德华、弗氏柠檬酸杆菌均无阳性信号扩增，重复性好，灵敏度可达12 拷贝/μL。结果表明，研制的柱状黄杆菌SYBR Green I实时荧光定量PCR试剂盒具有特异、灵敏、快速、重复性好等特征，适合于大鲵临床样品的检测。
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| 关 键 词： | 大鲵；柱状黄杆菌；荧光定量PCR；16SrRNA基因 |
A SYBR Green I Real-time Quantitative PCR kit for detection of Flavobacterium columnar of giant salamander |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | giant salamander Flavobacterium columnar SYBR Green I Real -time Quantitative PCR 16S rRNA gene |
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