LR 型微囊藻毒素对鲢鱼PEPCK基因表达的影响

在前期经LR 型微囊藻毒素（MC-LR）处理后建立鲢鱼肝脏组织抑制差减杂交文库的基础上，利用RACE 方法克隆了经MC-LR 处理后差异表达明显的鲢鱼磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK 基因cDNA 全长，并对其进行了序列分析，然后通过半定量分析了经MC-LR 投与1、5、10 h鲢鱼肝脏组织PEPCK 表达水平。结果显示：鲢鱼PEPCK 基因cDNA 全长2 605 bp，包括101 bp 的5'' 端非翻译区、564 bp 的3'' 端非翻译区、1911 bp 的开放阅读框，编码636 个氨基酸。将鲢鱼PEPCK 基因cDNA 核酸及氨基酸序列与GenBank 中已发表的其他几种鱼类的相应序列进行比对，表明鲢鱼PEPCK 与翘嘴红鲌的同源性最高，其核酸及氨基酸序列的相似性分别达到97%和99%；其次为斑马鱼，同源性均达到90%以上；与星斑川鲽的同源性最差，但核酸及氨基酸序列的相似性也分别达到77%和84%，说明鱼类PEPCK 在长期的进化过程中具有很高的保守性。鲢鱼PEPCK 具有与草酰乙酯结合的特有结构域以及与GTP 三磷酸链结合的激酶1 和激酶2 基序。另外，鲢鱼投予MC-LR 后，肝脏组织PEPCK 经过1、5、10 h 的表达量均有显著升高，说明鲢鱼投予MC-LR 1 h内该基因即被诱导表达，且在10 h内皆维持较高的表达水平。这与微囊藻毒素作用有关，推测与微囊藻毒素解毒过程相关。

MC-LR effects on the expression of PEPCK genes in the silver carp