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氟苯尼考耐药基因floR LAMP检测方法的建立及应用
引用本文:冯世文,李军,潘艳,彭昊,贺会利,钟舒红,胡帅,曾芸. 氟苯尼考耐药基因floR LAMP检测方法的建立及应用[J]. 动物医学进展, 2019, 0(8): 24-28
作者姓名:冯世文  李军  潘艳  彭昊  贺会利  钟舒红  胡帅  曾芸
作者单位:广西兽医研究所;广西兽医生物技术重点实验室;广西大学动物科学技术学院
基金项目:广西科技重大专项项目(桂科AA17204057);广西自然科学基金项目(桂科自2013GXNSFAA019093)
摘    要:为建立快速、灵敏且可定量检测氟苯尼考耐药基因floR的环介导等温扩增方法(LAMP),根据GenBank登录的革兰阴性菌floR基因保守序列,利用PrimerExploerV4设计特异性LAMP引物,成功建立了快速检测氟苯尼考耐药floR基因的LAMP方法。该LAMP检测方法反应温度为63℃,反应时间为60min,具有可实时监测反应、定量检测出floR基因的拷贝数,以及操作简便的特点,灵敏度高,检测限为6.24×100拷贝,是普通PCR的100倍。用建立的方法检测对氟苯尼考不同敏感性的大肠埃希菌floR基因,结果显示,对氟苯尼考敏感、中介和耐药的菌株均检测到floR基因,其拷贝数与菌株MIC相关,提示floR基因不仅存在于氟苯尼考耐药菌中。所建立的floR基因LAMP检测方法可为floR基因的监测,以及氟苯尼考耐药性产生和传播机制的研究提供新的技术手段。

关 键 词:氟苯尼考耐药基因floR  环介导等温扩增  建立和应用

Establishment and Application of a Loop-mediated Isothermal Amplification Method for Detection of Florfenicol Resistance Gene floR
FENG Shi-wen,LI Jun,PAN Yan,PENG Hao,HE Hui-li,ZHONG Shu-hong,HU Shuai,ZENG Yun. Establishment and Application of a Loop-mediated Isothermal Amplification Method for Detection of Florfenicol Resistance Gene floR[J]. Progress In Veterinary Medicine, 2019, 0(8): 24-28
Authors:FENG Shi-wen  LI Jun  PAN Yan  PENG Hao  HE Hui-li  ZHONG Shu-hong  HU Shuai  ZENG Yun
Affiliation:(Guangxi Veterinary Research Institute,Nanning,Guangxi, 530001,China;Guangxi Key Laboratory of Veterinary Biotechnology, Nanning,Guangxi,530001,China;College of Animal Science and Technology,Guangxi University,Nanning,Guangxi,530004,China)
Abstract:FENG Shi-wen;LI Jun;PAN Yan;PENG Hao;HE Hui-li;ZHONG Shu-hong;HU Shuai;ZENG Yun(Guangxi Veterinary Research Institute,Nanning,Guangxi, 530001,China;Guangxi Key Laboratory of Veterinary Biotechnology, Nanning,Guangxi,530001,China;College of Animal Science and Technology,Guangxi University,Nanning,Guangxi,530004,China)
Keywords:florfenicol resistance gene floR  LAMP  establishment and application
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