| 猪附红细胞体实时荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 朱绍辉 吴延功 单虎 王志亮 姜同泉 孙承英 赵永刚. 猪附红细胞体实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 中国兽医科技, 2007, 37(2): 108-112 |
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| 作者姓名： | 朱绍辉 吴延功 单虎 王志亮 姜同泉 孙承英 赵永刚 |
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| 作者单位： | [1]莱阳农学院动物科技学院,山东青岛266109 [2]中国动物卫生与流行病学中心,山东青岛266032 |
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| 基金项目： | 国家“十五”科技攻关计划项目（2004BA514A） |
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| 摘 要： | 参照猪附红细胞体16S rRNA基因序列设计了1对引物，分别以标准株和分离株的基因组DNA为模板，采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法检测猪附红细胞体，确定特异性产物的Tm值，同时做普通PCR。试验结果表明，特异性产物的Tm值为88．5℃，最低能检测到含0．036fg／μL阳性质粒的标准品。以阳性质粒标准品10倍倍比稀释的模板进行实时荧光定量PCR，通过对反应体系和反应条件进行筛选和优化，建立了检测猪附红细胞体的标准曲线。建立的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法显示了较好的特异性、敏感性和广谱性，为猪附红细胞体病的临床检测和流行情况调查提供了新的技术手段。
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| 关 键 词： | 猪附红细胞体 实时荧光定量PCR 荧光染料 |
| 文章编号： | 1673-4696（2007）02-0108-05 |
| 收稿时间： | 2006-10-13 |
| 修稿时间： | 2006-12-11 |
Establishment of a real-time fluorescent quantitative PCR assay for the detection of Eperythrozoon suis |
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| ZHU Shao-hui,WU Yan-gong,SHAN Hu,WANG Zhi-liang, JIANG Tong-quan, SUN Cheng-ying, ZHAO Yong-gang. Establishment of a real-time fluorescent quantitative PCR assay for the detection of Eperythrozoon suis[J]. Chinese Journal of Veterinary Science and Technology, 2007, 37(2): 108-112 |
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| Authors: | ZHU Shao-hui WU Yan-gong SHAN Hu WANG Zhi-liang JIANG Tong-quan SUN Cheng-ying ZHAO Yong-gang |
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