猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒双重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

本研究根据PRRSV GL膜蛋白基因和CSFV多聚蛋白基因，分别设计2对特异性引物和1条TaqMan探针，建立了同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒的双重TaqMan荧光定量RT-PCR方法。结果表明，该方法只对猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒特异性良好，不与非洲猪瘟、猪圆环病毒Ⅱ型、猪伪狂犬病毒、猪细小病毒等常发猪病存在交叉反应；PRRSV和CSFV的检出下限分别为1.41拷贝/μL和1.6拷贝/μL;组内和组间Ct值变异系数都小于1.3%。对175份临床采集的样品检测，PRRSV单一阳性样品27份，CSFV单一阳性样品16份，检测双阳性样品24份。本方法敏感高、特异强，可以用于猪场的快速检测与诊断。