红花查尔酮合成酶基因的克隆、结构及表达分析

黄酮类物质是红花的主要活性成分，查尔酮合成酶（Chalcone synthase,CHS）是黄酮类物质合成过程中的关键限速酶。为解析红花黄酮类物质的合成途径，以大果球红花为材料，通过逆转录PCR(RT-PCR)及PCR技术克隆红花CHS(CtCHS)基因的cDNA和gDNA序列，分析其基因结构、蛋白质结构和系统进化关系，采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析CtCHS基因的组织表达模式及激素处理下的表达模式。结果表明，CtCHS基因的cDNA序列长1 317 bp,gDNA序列长1 815 bp，由2个外显子和1个内含子构成。内含子AT含量明显高于GC含量，且明显高于外显子中AT含量，内含子序列含有类似增强子及光照、干旱胁迫响应的顺式作用元件，可能在增强基因转录中发挥作用，并可能受光照、干旱等胁迫的诱导。该基因的cDNA序列包含1个1 206 bp的最大开放阅读框，编码401个氨基酸，相应的蛋白质为亲水性蛋白，无信号肽序列，不存在跨膜结构，定位于细胞质。药用植物CHS系统进化分析结果表明，CtCHS与矢车菊CHS的进化关系最近，与白芨、铁皮石斛等CHS的进化关系较远，且药用植...