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| 猪视网膜上皮细胞的分离培养与鉴定 | |
| 作者姓名： | 张艳 谢金文 刘博 曹宗喜 谷英华 魏凤 王文秀 |
| 作者单位： | 1. 海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室;2. 海南省农业科学院畜牧兽医研究所;3. 山东省滨州畜牧兽医研究院;5. 山东绿都生物科技有限公司 |
| 摘 要： | 旨在建立猪视网膜上皮细胞(PRECs)的分离纯化及传代培养方法。采用组织块贴壁法和消化法分离猪视网膜细胞(PRCs),经差速消化法纯化细胞,筛选确定最优培养条件并鉴定细胞生物学特性。结果：消化法分离的细胞约1周长成单层,组织块贴壁法约2周长满单层,但活力更高;PRCs主要形态为长梭形和大理石样,呈现为2种形态细胞混合生长;差速消化法纯化细胞后,经间接免疫荧光鉴定细胞角蛋白(CK18和CK19),确定该细胞为上皮细胞;细胞接种猪圆环病毒2型(PCV2)可产生明显病变。综上,本试验成功分离获得PRECs,含胎牛血清浓度为12%的α-MEM为最优培养基,该细胞支持PCV2增殖并产生明显的细胞病变,为进一步建立稳定传代的猪视网膜上皮细胞系及研究PCV2感染及致病机理提供基础。 |
| 关 键 词： | 猪视网膜上皮细胞 组织块贴壁法 细胞角蛋白 |