猪繁殖与呼吸综合征病毒凝胶层析纯化方法的建立与初步应用

为了高效分离纯化并获得结构完整的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),用于PRRSV的形态学研究、动物免疫以及制备高质量疫苗，本试验在Marc-145细胞中增殖PRRSV HuN4株，经超滤浓缩后，分别采用氯化铯密度梯度离心方法和凝胶层析技术纯化PRRSV。结果显示，与氯化铯密度梯度离心相比，凝胶层析纯化可以得到纯度更高、结构更完整的病毒粒子。将凝胶层析纯化得到的PRRSV免疫小鼠制备多抗，间接免疫荧光试验(IFA)结果显示，多抗血清可与PRRSV发生特异性反应；酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示，抗体效价可达到1∶25 600以上，纯化的病毒具有良好的免疫原性。结果表明，应用凝胶层析技术可得到高纯度、结构完整的PRRSV粒子，且纯化后PRRSV能够诱导良好的免疫应答，本试验结果可为PRRSV的纯化提供参考。