盖塔病毒非结构蛋白NSP1多克隆抗体的制备及鉴定 |
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引用本文: | 张洁,李超凡,翟晓风,粟硕.盖塔病毒非结构蛋白NSP1多克隆抗体的制备及鉴定[J].畜牧与兽医,2023(3):79-83. |
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作者姓名: | 张洁 李超凡 翟晓风 粟硕 |
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作者单位: | 南京农业大学免疫研究所 |
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基金项目: | 国家重点研发计划项目(2022YFC2604203); |
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摘 要: | 试验旨在获得能够特异性识别盖塔病毒(Getah virus, GETV)非结构蛋白NSP1的抗体,用于鉴定NSP1蛋白及其分布。采用RT-PCR技术扩增GETV的非结构蛋白NSP1基因,构建了NSP1蛋白的原核表达质粒pET-NSP1,转化至大肠杆菌BL21(DE3)诱导大量表达。纯化原核表达的目的蛋白,免疫BALB/c小鼠,制备了NSP1蛋白的多克隆抗体,间接ELISA效价达1∶105以上。Western blot和免疫荧光试验(IFA)结果显示,NSP1蛋白多克隆抗体与GETV有良好的反应性。NSP1蛋白多克隆抗体的制备,为进一步研究该蛋白在盖塔病毒复制周期中的功能奠定了基础。
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关 键 词: | 多克隆抗体 NSP1基因 非结构蛋白 盖塔病毒 |
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