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鸭圆环病毒无核定位信号衣壳蛋白的原核表达及其在间接ELISA中的应用
作者姓名:黄冠翔  闫祖杰  李志要  段进坤  鲍恩东
作者单位:1. 南京农业大学动物医学院;2. 天津瑞普生物技术股份有限公司生物制品研究院
基金项目:江苏省农业科技自主创新资金[CX(22)2016];
摘    要:鸭圆环病毒(DuCV)是一种具有长期免疫抑制特性的病原体,其Cap蛋白是DuCV的主要结构蛋白和主要免疫保护抗原,构成病毒的核衣壳,对DuCV的血清学诊断具有重要意义。为了开发出适合DuCV的检测方法,本研究在重组Rosetta大肠杆菌细胞内对无核定位信号的DuCV Cap蛋白进行了表达,建立了基于无核定位信号Cap蛋白检测DuCV血清抗体的间接ELISA方法(Cap-ELISA)。结果:Cap-ELISA包被抗原的最佳浓度为280 ng/孔,血清稀释比为1∶1 600;检测样本的阴阳临界值为0.339,灵敏度达到1∶12 800,并对DuCV抗体检测具有特异性;与常规PCR方法的符合率为92.7%,用Cap-ELISA对山东部分地区的樱桃谷鸭血清进行了间接ELISA检测,总阳性率为88.9%,说明该方法适合在DuCV血清学诊断中应用。

关 键 词:鸭圆环病毒  衣壳蛋白  原核表达  间接ELISA
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