| 伪狂犬病病毒gB基因荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 杨红杰,于长青,林树伯,于红欣,周双海,李继良.伪狂犬病病毒gB基因荧光定量PCR检测方法的建立[J].北京农学院学报,2015,30(3):48-51. |
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| 作者姓名： | 杨红杰 于长青 林树伯 于红欣 周双海 李继良 |
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| 作者单位： | 北京农学院动物科学技术学院,北京102206;北京市顺义区动物疫病预防控制中心,北京101300;天津市宁河原种猪场,天津,301504;北京农学院动物科学技术学院,北京,102206 |
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| 基金项目： | 天津市宁河原种猪场科技计划项目 |
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| 摘 要： | 用PCR方法扩增伪狂犬病病毒(PRV)的gB基因片段,构建含有gB基因片段的重组质粒,以不同浓度的PRV-gB基因重组质粒为模板应用SYBR Green I方法来建立检测PRV-gB基因载量的荧光定量PCR方法。结果显示:在(8.6×107~8.6×101)copies/μL范围内,回归方程为y=-3.5604x+41.165,其决定系数为0.9993,显示出优良的线性关系;扩增产物的熔解曲线仅有一个特异性单峰。该方法对猪圆环病毒、猪细小病毒、猪细环病毒等常见猪源DNA病毒进行检测时均没有扩增曲线,重复性试验的变异系数小于2%,表明建立了特异性强、重复性好、灵敏性高的PRV-gB基因SYBR Green I荧光定量PCR检测方法。用该方法检测8种商品伪狂犬病弱毒活疫苗的每头份剂量的病毒载量,结果显示不同商品伪狂犬病弱毒活疫苗之间的病毒载量存在明显差异,与其标识剂量基本一致,表明该荧光定量PCR检测方法可用于疫苗剂量检测。
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| 关 键 词： | 伪狂犬病病毒 gB基因 荧光定量PCR SYBR Green Ⅰ 疫苗剂量 |
Development of a fluorescent quantitative PCR detection method for pseudorabies virus gB gene |
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| YANG Hongjie
,
YU Changqing
,
LIN Shubo
,
YU Hongxin
,
ZHOU Shuanghai
,
LI Jiliang.Development of a fluorescent quantitative PCR detection method for pseudorabies virus gB gene[J].Journal of Beijing Agricultural College,2015,30(3):48-51. |
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| Authors: | YANG Hongjie YU Changqing LIN Shubo YU Hongxin ZHOU Shuanghai LI Jiliang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | pseudorabies virus gB gene fluorescent quantitative PCR SYBR Green Ⅰ vaccine dose |
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