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草鱼呼肠孤病毒衣壳蛋白靶向灭活转基因P0的构建
引用本文:秦波,程洛单,陈杰,蒋霞云,邹曙明.草鱼呼肠孤病毒衣壳蛋白靶向灭活转基因P0的构建[J].水产学报,2014,38(12):1956-1963.
作者姓名:秦波  程洛单  陈杰  蒋霞云  邹曙明
作者单位:上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306;上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306;上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306;上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306;上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室, 上海 201306
基金项目:国家“八六三”高技术研究发展计划(2011AA100403);国家自然科学基金(31272633,31201760);上海高校知识服务平台(ZF1206)
摘    要:为探索草鱼出血病防治新技术,实验采用衣壳蛋白靶向灭活(capsid-targeted viral inactivation,CTVI)策略,利用Tgf2转座子元件,构建了带爪蟾EF1α或鲤热休克蛋白70两种不同启动子的CTVI转基因质粒p Tgf2-EF1α-VP3-SN或p Tgf2-Hsp70-VP3-SN。该2种质粒均包含GCRV衣壳蛋白VP3与金黄色葡萄球菌核酸酶(Staphylococcus aureus nuclease,SN)融合表达阅读框。通过将2种CTVI转基因质粒与体外合成的Tgf2转座酶5'加帽mRNA共同显微注射入草鱼1~2细胞期受精卵,获得了带2种不同启动子的CTVI转基因草鱼群体。PCR和测序结果显示,2种转基因阳性草鱼基因组中均含有外源GCRV衣壳蛋白VP3与SN基因片段,阳性率分别为40.2%和37.0%,表明Tgf2转座子已成功介导CTVI融合表达基因整合到草鱼基因组中。本实验共获得了120尾P0CTVI转基因个体,为将来构建抗出血病草鱼新品系奠定了基础材料。

关 键 词:草鱼  草鱼出血病  呼肠孤病毒  衣壳蛋白靶向灭活  转基因
收稿时间:2014/7/22 0:00:00
修稿时间:2014/10/17 0:00:00

Construction of transgenic P0 grass carp by capsid-targeted viral inactivation of reovirus
QIN Bo,CHENG Luodan,CHEN Jie,JIANG Xiayun and ZOU Shuming.Construction of transgenic P0 grass carp by capsid-targeted viral inactivation of reovirus[J].Journal of Fisheries of China,2014,38(12):1956-1963.
Authors:QIN Bo  CHENG Luodan  CHEN Jie  JIANG Xiayun and ZOU Shuming
Institution:Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China
Abstract:
Keywords:Ctenopharyngodon idella  hemorrhage  reovirus  capsid-targeted viral inactivation  transgenesis
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