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| 含GFP报告基因的伪狂犬病病毒上海株gE-gI基因部分缺失株的构建 | |
| 引用本文： | 姜焱,侯玉峰,陈溥言. 含GFP报告基因的伪狂犬病病毒上海株gE-gI基因部分缺失株的构建[J]. 农业生物技术学报, 2002, 10(4): 363-366 |
| 作者姓名： | 姜焱 侯玉峰 陈溥言 |
| 作者单位： | 1. 江苏出入境检验检疫局动检实验室,南京 210001 2. 南京出入境检验检疫局,南京,210001 3. 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室,南京,210095 |
| 基金项目： | 上海市农委重点攻关课题. |
| 摘 要： | 在伪狂犬病病毒（pseudorabies virus,PRV)上海株gI基因和gE基因克隆鉴定的基础上，进一步构建了转移载体质粒，为PRV－SH的gE－gI基因部分缺失毒株的构建作准备，将gI和gE基因克隆入pUC18中构建pgEI载体，利用gE基因中的酶切位点缺失掉gE基因5′端363bp，并把录色荧光蛋白（GFP）基因表达盒插入到缺失部分。通过酶切鉴定，表明GFP基因已3插入到pgEI中，构建了含GFP的缺失转移载体pgEI-GFP。用DOTAP试剂将pgEI-GFP转染感染了PRV－SH株的兔肾（RK）细胞，待出现80％以上的细胞病变时收获病毒，并以GFP为标志，通过蚀斑法得到纯化重组病毒，命名为PFDE／DI。 |
| 关 键 词： | GFP报告基因 伪狂犬病病毒上海株 gE－gI基因 部分缺失株 构建 gE基因 转移载体质粒 绿色荧光蛋白 家畜 |
| 修稿时间： | 2001-11-16 |
Construction of Transfer Plasmid Vector of gE-gIGene Partial Deletion Mutant of Pseudorabies Virus SH Strain Including GFP Report Gene |
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