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UPLC-MS/MS同时测定土壤中19种植物激素方法的建立和验证
引用本文:卢玉秋,宋阿琳,唐治玉,李艳玲,董炜灵,王恩召,唐治喜,范分良. UPLC-MS/MS同时测定土壤中19种植物激素方法的建立和验证[J]. 植物营养与肥料学报, 2019, 25(6): 953-962. DOI: 10.11674/zwyf.18129
作者姓名:卢玉秋  宋阿琳  唐治玉  李艳玲  董炜灵  王恩召  唐治喜  范分良
作者单位:1.中国农业科学院农业资源与农业区划研究所/农业部植物营养与肥料重点实验室,北京 100081
基金项目:国家重点研发计划项目(2016YFD0200109,2016YFD0800707);国家自然科学基金(41571297);基本科研业务费项目(1610132019011,1610132019021)。
摘    要:[目的]本文旨在建立土壤中多种植物激素的提取及超高效液相色谱串联质谱法,并用此方法同时测定土壤中茉莉酸、吲哚-3-乙酸、反式玉米素,玉米素核苷、异戊烯基腺嘌呤、吲哚-3-丁酸、N6-异戊烯基腺嘌呤、独脚金内酯、玉米素、二氢玉米素核苷、吲哚-3-丙酸、吲哚-3-乙酸甲酯、二氢玉米素、吲哚-3-羧酸、茉莉酸甲酯、油菜素内酯、脱落酸、赤霉素、水杨酸共19种植物激素含量。[方法]以根标土壤为试验材料,采用异丙醇水甲酸(80∶19∶1,V/V/V)作为提取剂,经过超声、离心后得到植物激素提取液,提取液于常温条件下真空浓缩至干,采用甲醇进行复溶,得到植物激素待测液。采用Waters ACQUITYUPLC■HSST3色谱柱对19种植物激素进行分离,以0.30 mmol/L甲酸铵水溶液(含0.01%甲酸)作为流动相A和0.30 mmol/L甲酸铵乙腈(含0.01%甲酸)作为流动相B进行梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,柱温为30℃;采用超高效液相色谱串联质谱,多反应监测离子模式进行定性定量分析,其中,茉莉酸、吲哚-3-乙酸、反式玉米素、玉米素核苷、异戊烯基腺嘌呤、吲哚-3-丁酸、N6-异戊烯基腺嘌呤、独脚金内酯、玉米素、二氢玉米素核苷、吲哚-3-丙酸、吲哚-3-乙酸甲酯、二氢玉米素、吲哚-3-羧酸、茉莉酸甲酯、油菜素内酯采用正离子模式扫描,脱落酸、赤霉素、水杨酸采用负离子模式扫描;采用外标法测定植物激素回收率。[结果]在本试验浓度范围内,上述19种植物激素浓度与对应峰面积的相关系数(r)均大于0.99,检出限介于0.02~1.06 ng/g之间,19种植物激素的加标回收率为70.2%~117%,相对标准偏差介于0.20%~7.3%之间。采用优化后的实验方法测定土壤中的植物激素,结果检测出吲哚-3-乙酸、吲哚-3-羧酸、吲哚-3-乙酸甲酯、水杨酸和独角金内酯5种植物激素,含量为0.55~5.79ng/g。[结论]本方法前处理不需要过夜浸提,加入二氯甲烷后,超声离心浓缩复溶后可直接进样检测,大大缩短了样品的前处理时间,超高效液相色谱串联质谱法操作简单,选择性好,灵敏度高,可实现土壤样品中多种植物激素的同时检测,为土壤中植物激素的深入研究提供了一种有效的研究方法。

关 键 词:根标土壤  超高效液相色谱串联质谱  植物激素
收稿时间:2018-04-12

Establishment and validation of UPLC-MS/MS method for simultaneous determination of 19 phytohormones in soil
LU Yu-qiu,SONG A-lin,TANG Zhi-yu,LI Yan-ling,DONG Wei-ling,WANG En-zhao,TANG Zhi-xi,FAN Fen-liang. Establishment and validation of UPLC-MS/MS method for simultaneous determination of 19 phytohormones in soil[J]. Plant Nutrition and Fertilizer Science, 2019, 25(6): 953-962. DOI: 10.11674/zwyf.18129
Authors:LU Yu-qiu  SONG A-lin  TANG Zhi-yu  LI Yan-ling  DONG Wei-ling  WANG En-zhao  TANG Zhi-xi  FAN Fen-liang
Affiliation:1.Institute of Agricultural Resources and Regional Planning, CAAS / Key Laboratory of Plant Nutrition and Fertilizer in the Ministry of Agriculture, Beijing 100081, China
Abstract:LU Yu-qiu;SONG A-lin;TANG Zhi-yu;LI Yan-ling;DONG Wei-ling;WANG En-zhao;TANG Zhi-xi;FAN Fen-liang(Institute of Agricultural Resources and Regional Planning,CAAS / Key Laboratory of Plant Nutrition and Fertilizer in the Ministry of Agriculture,Beijing 100081,China;National Institute of Metrology,China,Beijing 100029,China;Central South University,Changsha 410083,China)
Keywords:rhizosphere soil  UPLS-MS/MS  phytohormone
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