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口蹄疫病毒可视化RT-LAMP检测方法的建立
引用本文:王韦华,刘桂梅,吴奇强,黄鹏波,白 鸽,王国超.口蹄疫病毒可视化RT-LAMP检测方法的建立[J].西北农业学报,2018,27(12):1736-1744.
作者姓名:王韦华  刘桂梅  吴奇强  黄鹏波  白 鸽  王国超
作者单位:(1.渭南职业技术学院,陕西渭南 714000; 2.渭南市动物疫病预防控制中心,陕西渭南 714000)
基金项目:陕西省农业科技创新转化项目(NYKJ-2015-021)。
摘    要:旨在建立口蹄疫病毒可视化逆转录环介导等温核酸扩增(RT-LAMP)快速检测方法。以猪口蹄疫灭活疫苗为材料,设计两对RT-LAMP引物,建立FMDV可视化RT-LAMP检测方法,并与普通PCR检测方法进行比较,同时进行特异性试验和敏感性试验。对从油佐剂疫苗中提取FMDV核酸方法进行比较结果发现,用商品化试剂盒提取时,3种样品处理方法对病毒RNA提取量没有显著影响;Trizol法提取RNA时,从油佐剂疫苗中直接提取,获得的RNA量最大,与其他2种方法差异极显著(P0.01)。建立了口蹄疫病毒可视化RT-LAMP方法,该方法检测到模板RNA最低稀释度为10-9,比RT-PCR方法灵敏10倍,特异性好。

关 键 词:口蹄疫病毒  逆转录环介导等温核酸扩增  检测
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