口蹄疫病毒可视化RT-LAMP检测方法的建立 |
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引用本文: | 王韦华,刘桂梅,吴奇强,黄鹏波,白 鸽,王国超.口蹄疫病毒可视化RT-LAMP检测方法的建立[J].西北农业学报,2018,27(12):1736-1744. |
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作者姓名: | 王韦华 刘桂梅 吴奇强 黄鹏波 白 鸽 王国超 |
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作者单位: | (1.渭南职业技术学院,陕西渭南 714000; 2.渭南市动物疫病预防控制中心,陕西渭南 714000) |
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基金项目: | 陕西省农业科技创新转化项目(NYKJ-2015-021)。 |
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摘 要: | 旨在建立口蹄疫病毒可视化逆转录环介导等温核酸扩增(RT-LAMP)快速检测方法。以猪口蹄疫灭活疫苗为材料,设计两对RT-LAMP引物,建立FMDV可视化RT-LAMP检测方法,并与普通PCR检测方法进行比较,同时进行特异性试验和敏感性试验。对从油佐剂疫苗中提取FMDV核酸方法进行比较结果发现,用商品化试剂盒提取时,3种样品处理方法对病毒RNA提取量没有显著影响;Trizol法提取RNA时,从油佐剂疫苗中直接提取,获得的RNA量最大,与其他2种方法差异极显著(P0.01)。建立了口蹄疫病毒可视化RT-LAMP方法,该方法检测到模板RNA最低稀释度为10-9,比RT-PCR方法灵敏10倍,特异性好。
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关 键 词: | 口蹄疫病毒 逆转录环介导等温核酸扩增 检测 |
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