应用双重数字PCR对转基因玉米成分进行定量方法研究 |
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引用本文: | 潘广,章桂明,黄新,向才玉,程颖慧,陈枝楠,谢晓露,凌杏园.应用双重数字PCR对转基因玉米成分进行定量方法研究[J].植物检疫,2016(3):65-71. |
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作者姓名: | 潘广 章桂明 黄新 向才玉 程颖慧 陈枝楠 谢晓露 凌杏园 |
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作者单位: | 1. 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 广东深圳518045;2. 中国检验检疫科学研究院;3. 深圳市检验检疫科学研究院 |
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基金项目: | 质检公益项目(201410014-2),深圳市基础研究计划项目(JC201105190969A),国家质检总局项目(2015IK265) |
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摘 要: | 基于微滴式数字PCR平台,研究建立了一种在同一个微滴反应体系中同时测定样品中两种靶序列的双重微滴式数字PCR定量方法。结果表明,所建立的T25品系双重PCR方法能特异性检出转基因玉米T25,而其他转基因玉米、油菜、水稻等作物品系均没有扩增。灵敏度实验数据表明,所建立的T25双重数字PCR方法,在相对标准偏差≤25%时可以检测到4.6个T25特异性边界序列分子,在不考虑各重复间相对标准偏差的情况下可以检测到1个拷贝。定量结果准确性比较研究显示,与采用分别定量内源基因和T25边界序列来定量转基因成分结果相比较,所建立的T25双重数字PCR定量结果因消除了取样误差结果更准确,以上研究结果表明双重微滴式数字PCR定量方法比单重微滴式数字PCR定量方法更适用于进出境农产品转基因成分的定量检测。
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关 键 词: | 微滴式数字PCR 转基因玉米 定量 |
Studies on quantification of transgenic maize ingredient with duplex droplet digital polymerase chain reaction |
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Abstract: | |
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Keywords: | droplet digital polymerase chain reaction(ddPCR) genetically modified maize quantification |
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