马疱疹病毒1型ORF5基因分子特征分析及原核表达载体的构建

马疱疹病毒1型(EHV-1)对马产业造成严重的经济损失。该病的防控主要依赖疫苗免疫,但是现有的检测方法不能有效区分疫苗免疫与自然感染,给流行病学调查和疫病的防控带来了一定的阻碍。本研究聚焦EHV-1的非结构蛋白,以EHV-1 XJ2015株为研究对象,扩增ORF5基因进行其遗传进化分析、氨基酸序列差异性分析、蛋白质性质分析,并根据分析结果设计引物扩增保守性与抗原性高的片段,构建原核表达载体,结果表明与31株EHV-1病毒ORF5基因核苷酸序列相似性达94.9%～100%,EICP27蛋白包含一个核定位信号,无核外运信号、无跨膜螺旋结构域、无信号肽,第75～204位氨基酸易形成潜在的抗原表位;对重组质粒pET-32a(+)-NSP5进行PCR鉴定,进行凝胶电泳观察结果,条带大小与目的基因相符,表明重组质粒pET-32a(+)-NSP5构建成功。本研究为区分EHV-1自然感染与疫苗免疫的检测方法的建立奠定基础。