| 检测和鉴别犬瘟热病毒强、弱毒株的复合反转录-套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)的建立及初步应用 |
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| 引用本文： | 司微,崔尚金,张洪英,刘立奎. 检测和鉴别犬瘟热病毒强、弱毒株的复合反转录-套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)的建立及初步应用[J]. 中国预防兽医学报, 2007, 29(3): 222-226 |
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| 作者姓名： | 司微 崔尚金 张洪英 刘立奎 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 摘 要： | 根据GenBank上登录的犬瘟热病毒（Canine distemper virus，CDV）基因组全序列，选择CDV强、弱毒株间有区别保守区设计了一对通用引物P1和P4，并在该对引物跨越区域的内部设计了CDV强毒株特异性引物P2及弱毒株特异性引物P3，用引物P1／P4进行RT—PCR，然后用引物P2／P3／P4进行复合套式PCR，建立了一种能区分CDV强、弱毒株的复合反转录-套式聚合酶链式反应（RT—nPCR）的鉴别诊断方法。应用该方法从CDV强、弱毒株的基因组中分别扩增出了大小为247bp和177bp的特异性片段，从两种病毒基因组混合物中扩增出了大小为247bp和177bp的两条特异性片段，与犬细小病毒、犬腺病毒、犬冠状病毒、狂犬病病毒、新城疫病毒的细胞培养物以及正常细胞对照组进行复合RT—nPCR扩增时均为阴性。对从黑龙江省和吉林省采集的20份疑似CDV病料进行的检测结果表明，有15份类似CDV强毒，5份类似CDV弱毒。本研究建立的复合RT—nPCR可以有效检测CDV感染，能够将强、弱毒株区分开，可用于临床快速检测、流行病学监测以及追踪疫苗免疫效果等。
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| 关 键 词： | 犬瘟热病毒 复合反转录-套式聚合酶链式反应 鉴别诊断 |
| 文章编号： | 1008-0589（2007）03-0222-05 |
| 收稿时间： | 2006-11-20 |
| 修稿时间： | 2006-11-20 |
A multiplex reverse transcription-nested polymerase chain reaction for detection and differentiation of wild-type and vaccine strains of canine distemper virus |
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| SI Wei,CUI Shang-jin,ZHANG Hong-ying,LIU Li-kui. A multiplex reverse transcription-nested polymerase chain reaction for detection and differentiation of wild-type and vaccine strains of canine distemper virus[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2007, 29(3): 222-226 |
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| Authors: | SI Wei CUI Shang-jin ZHANG Hong-ying LIU Li-kui |
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