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H5亚型禽流感病毒HA基因的克隆、表达及其生物学活性的初步分析
引用本文:武山,陈晨,雷霆,曹红,陈福勇. H5亚型禽流感病毒HA基因的克隆、表达及其生物学活性的初步分析[J]. 农业生物技术学报, 2005, 13(6): 739-742
作者姓名:武山  陈晨  雷霆  曹红  陈福勇
作者单位:中国农业大学动物医学院,北京,100094
摘    要:参考GenBank上发表的H5亚型禽流感病毒(Avianinfluenza virus,AIV)血凝素(HA)基因序列设计引物,经RT-PCR扩增HA基因的HA1片段,再将其克隆到原核表达载体PET-28a中,用大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)原核表达,SDS-PAGE和Western blot对表达蛋白进行鉴定.Western blot结果表明,表达蛋白能与H5亚型AIV单特异性血清特异性反应.交叉反应试验表明,此蛋白具有良好的抗原性,可被H5亚型AIV抗体特异性识别且无交叉反应.用变性纯化后的蛋白建立了对AIV抗体检测的间接ELISA,并对236份鸡血清样本进行了实验室检测.检测结果与血凝抑制试验检测结果符合率达到100%.综合研究表明,表达蛋白具有良好抗原性.

关 键 词:禽流感病毒 H5亚型 血凝素(HA) 原核表达 ELISA
收稿时间:2004-12-16
修稿时间:2005-10-13

Expression of Hemagglutinin Gene of Avian influenza virus Subtype H5 in Escherichia coli and the Preliminary Analysis of Bioactivity
WU Shan,CHEN Chen,LEI Ting,CAO Hong,CHEN Fu-Yong. Expression of Hemagglutinin Gene of Avian influenza virus Subtype H5 in Escherichia coli and the Preliminary Analysis of Bioactivity[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2005, 13(6): 739-742
Authors:WU Shan  CHEN Chen  LEI Ting  CAO Hong  CHEN Fu-Yong
Affiliation:College of Veterinary Medicine, China Agriculture University, Beifing100094, China
Abstract:
Keywords:
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