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破伤风毒素C片段基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达
引用本文:刘婷,焦新安,潘志明,张晓明,黄金林.破伤风毒素C片段基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达[J].中国兽医学报,2007,27(3):347-350.
作者姓名:刘婷  焦新安  潘志明  张晓明  黄金林
作者单位:扬州大学,生物科学与技术学院,江苏,扬州,225009
基金项目:国家自然科学基金;全国优秀博士论文作者奖励计划
摘    要:应用PCR技术直接从破伤风梭菌64008菌株基因组中扩增出1356bp的破伤风毒素C片段基因,该片段是与靶细胞起结合作用的重链C端基因,经DNA序列测定分析,扩增出的基因与GenBank上登陆的序列AFl54828的同源性达到99.2%。将此基因克隆入大肠杆菌融合表达载体pET-30a(+),构建成重组表达质粒pET—TetC,并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达,经SDS—PAGE蛋白电泳鉴定,表达产物约为50000的重组蛋白,其表达量占菌体总蛋白的33.5%,经免疫印迹试验证实该重组蛋白是破伤风毒素C片段抗原。动物试验证明,此重组抗原具有良好的免疫原性,能保护动物免受破伤风毒素的攻击。

关 键 词:破伤风毒素C片段  大肠杆菌  克隆  表达
文章编号:1005-4545(2007)03-0347-04
修稿时间:2006-08-15

Cloning and high-level expression of tetanus toxin fragment C in E.coli
LIU Ting,JIAO Xi-nan,PAN Zhi-ming,ZHANG Xiao-ming,HUANG Jin-lin.Cloning and high-level expression of tetanus toxin fragment C in E.coli[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2007,27(3):347-350.
Authors:LIU Ting  JIAO Xi-nan  PAN Zhi-ming  ZHANG Xiao-ming  HUANG Jin-lin
Institution:College of Bioscience and biotechnology, Yangzhou, Jiangsu 225009, China
Abstract:
Keywords:tetanus toxin fragment C  E  coli  clone  expression
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