| 罗非鱼肝脏中超氧化物歧化酶的提取、纯化与分析 |
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| 引用本文： | 吴燕燕. 罗非鱼肝脏中超氧化物歧化酶的提取、纯化与分析[J]. 水产学报, 2007, 31(4): 518-524 |
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| 作者姓名： | 吴燕燕 |
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| 作者单位： | 中国水产科学研究院南海水产研究所,广东,广州,510300;国家食品质量监督检验中心,广东,广州,510110 |
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| 基金项目： | 广东省科技攻关项目;广东省科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 以奥尼罗非鱼肝脏为原料,研究加热法提取超氧化物歧化酶(SOD)的工艺条件,丙酮沉淀回收酶法和HitrapTMQ FF阴离子柱纯化Cu,Zn-SOD,并对其酶学性质进行分析。结果表明加热法提取SOD时,在缓冲液中加入10mmol.L-1CuCl2,调节pH为5.6,65℃进行加热处理,可以提高SOD粗酶的稳定性和得率,其得率为57%,粗酶比活为(2580±6)U.mg-1。对酶的酶学性质研究表明纯化后SOD比活为(4895±2)U.mg-1,SDS-PAGE电泳为单一蛋白酶带,分子量为36ku,最大紫外吸收波长为265nm。该酶在pH6.0~9.0具有较好的稳定性,在75℃以下稳定,具有较好的耐热性。氰化钾、脲素、β-巯基乙醇、H2O2、对Cu,Zn-SOD具有明显的抑制作用;EDTA浓度小于3mmol.L-1时,对Cu,Zn-SOD活性有明显增强作用,EDTA浓度大于3mmol.L-1时,对Cu,Zn-SOD活性有抑制作用;DTT的修饰使Cu,Zn-SOD活性显著增加。为进一步研究和应用罗非鱼肝脏SOD提供了基础参数。
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| 关 键 词： | 奥尼罗非鱼 肝脏 超氧化物歧化酶 加热法 纯化 |
| 文章编号： | 1000-0615（2007）04-0518-07 |
| 收稿时间： | 2007-07-16 |
| 修稿时间： | 2006-11-30 |
Extraction purification and analysis of superoxide dismutase |
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| WU Yanyan. Extraction purification and analysis of superoxide dismutase[J]. Journal of Fisheries of China, 2007, 31(4): 518-524 |
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| Authors: | WU Yanyan |
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| Affiliation: | South China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Guangzhou 510300,China |
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