PRRSVNsp9蛋白基因的RT—LAMP检测方法的建立 |
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引用本文: | 王腾,李巍,张秀媛,朱玉婵,孙继国.PRRSVNsp9蛋白基因的RT—LAMP检测方法的建立[J].兽医大学学报,2013(11):1631-1635. |
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作者姓名: | 王腾 李巍 张秀媛 朱玉婵 孙继国 |
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作者单位: | 河北农业大学动物科技学院,河北保定071000 |
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基金项目: | 河北省科技支撑计划资助项目(10220401D) |
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摘 要: | 根据GenBank中登录的PRRSVNsp9基因序列,应用PrimerExplorerV4软件,在该基因序列中选取保守区设计了4条RT—LAMP引物,旨在建立1种针对Nsp9蛋白基因的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)的快速检测方法。采用引物分组扩增的方法对引物进行了检测,以确保引物的可靠性。对反应体系、温度以及时间进行了优化,检测了该方法的特异性和灵敏度。结果表明,该方法在等温条件下只需50min就能检测出结果。与RT-PCR方法相比,在判定检测结果时不需要借助昂贵仪器设备,具有高特异性、高灵敏度、操作简便快速等特点,适合于临床检测的应用。
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关 键 词: | PRRSV Nsp9 RT LAMP 引物检测 |
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