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马铃薯S病毒PVSO株系RT-LAMP检测方法的建立及应用
引用本文:李华伟,许泳清,罗文彬,纪荣昌,刘中华,许国春,张鸿,李国良,林赵淼,邱永祥,邱思鑫,汤浩.马铃薯S病毒PVSO株系RT-LAMP检测方法的建立及应用[J].园艺学报,2018,45(8):1613-1620.
作者姓名:李华伟  许泳清  罗文彬  纪荣昌  刘中华  许国春  张鸿  李国良  林赵淼  邱永祥  邱思鑫  汤浩
作者单位:福建省农业科学院作物研究所,农业部南方薯类科学观测实验站,福州 350013
基金项目:福建省公益类科研院所基本科研专项(2016R1025-8);国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目(CARS-10-ES09);国家重点研发计划课题(2018YFD0200809);福建省农业科学院创新团队项目(STIT2017-2-3)
摘    要:为建立一种马铃薯S病毒普通株系PVSO快速、灵敏的RT-LAMP可视化检测方法。根据马铃薯S病毒普通株系的CP核苷酸序列设计4条引物,以感染PVS的马铃薯叶片总RNA为模板,采用一步法RT-LAMP,在62 ℃下反应60 min,扩增产物利用琼脂糖电泳分析和钙黄绿素染料显色判断结果,同时对其特异性和灵敏性进行测定。结果表明,建立的RT-LAMP方法可特异地对PVSO进行检测,检测灵敏度为RT-PCR的100倍。对33份马铃薯样品检测表明,RT-LAMP与RT-PCR方法检测结果基本一致。因此建立的PVSO的 RT-LAMP可视化检测方法简便,特异性强,灵敏度高,适合PVSO的快速检测。

关 键 词:马铃薯  马铃薯S病毒  环介导等温扩增  钙黄绿素  

Establishment of Loop-mediated Isothermal Amplification Assay for Detection of Potato virus S Ordinary Strain
LI Huawei,XU Yongqing,LUO Wenbin,JI Rongchang,LIU Zhonghua,XU Guochun,ZHANG Hong,LI Guoliang,LIN Zhaomiao,QIU Yongxiang,QIU Sixin,TANG Hao.Establishment of Loop-mediated Isothermal Amplification Assay for Detection of Potato virus S Ordinary Strain[J].Acta Horticulturae Sinica,2018,45(8):1613-1620.
Authors:LI Huawei  XU Yongqing  LUO Wenbin  JI Rongchang  LIU Zhonghua  XU Guochun  ZHANG Hong  LI Guoliang  LIN Zhaomiao  QIU Yongxiang  QIU Sixin  TANG Hao
Institution:Crop Research Institute,Fujian Academy of Agricultural Sciences,Scientific Observing and Experimental Station of Tuber and Root Crops in South China,Ministry of Agricultrue,P. R. China,Fuzhou 350013,China
Abstract:
Keywords:potato  Potato virus S  LAMP  calcein
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