甘蓝自交不亲和性相关基因BoPLL的克隆、定位与表达分析

对高度自交不亲和甘蓝柱头进行自花授粉和异花授粉处理后，取柱头进行蛋白质表达谱的比较研究，获得一种受自花授粉诱导下调表达，异花授粉诱导上调表达的蛋白，命名为BoPLL。进一步分析转录组数据发现，BoPLL在自花授粉0 ~ 30 min上调表达，30 ~ 60 min下调表达，而在异花授粉0 ~ 60 min一直上调表达。克隆获得cDNA为1 212 bp，编码含403个氨基酸残基的蛋白质BoPLL。序列分析发现BoPLL含有高度保守的PASTA结构域和CMM-10结构域、中度保守的PbH1结构域、低度保守的HYDRO结构域，说明该蛋白是典型的PLL家族蛋白。染色体定位结果表明，该基因与自交不亲和性相关基因不连锁。进化分析表明，甘蓝BoPLL与拟南芥AtPLL亲缘关系最近，与苜蓿MtPLL亲缘关系较远。RT-PCR发现，BoPLL在甘蓝花粉和柱头中表达，且柱头中的表达量明显低于花粉，在叶片、花蕾、萼片和花瓣中均没有检测到表达信号。荧光定量PCR结果显示，BoPLL在自花授粉和异花授粉15 ~ 60 min的表达变化趋势与转录组分析结果基本一致。根据上述结果推测BoPLL可能是一种参与甘蓝自交不亲和反应过程的基因。