| 玉米总蛋白质提取技术和蛋白质样品浓度测定方法的比较 |
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| 引用本文： | 杨文鹏,王明春,杨留启,王伟.玉米总蛋白质提取技术和蛋白质样品浓度测定方法的比较[J].种子,2010,29(12). |
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| 作者姓名： | 杨文鹏 王明春 杨留启 王伟 |
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| 作者单位： | 贵州省旱粮研究所;贵州省农业生物技术重点实验室; |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划)项目，贵州省农业科学院专项资金项目，贵州省科学技术基金 |
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| 摘 要： | 玉米组织蛋白质的提取及其浓度测定是进行玉米蛋白质组学研究的关键步骤。本研究以玉米叶片和花丝为试材,从总蛋白提取数量和质量方面比较分析了磷酸缓冲液法、Tris法、改进Tris法、TCA-acetone(三氯醋酸-丙酮沉淀)法、Plant Total Protein Extraction Kit试剂盒法及其改良法等6种玉米总蛋白质提取方法。同时,又比较分析了Bradford法、2-D Quant Kit试剂盒法和紫外分光光度法(UV法)等3种方法测定蛋白质浓度的准确性。结果表明:(1)总蛋白提取数量按大小顺序为:试剂盒法试剂盒改良法改进Tris法Tris法TCA-acetone法磷酸缓冲液法;(2)总蛋白提取质量依质量优劣为:试剂盒法试剂盒改良法TCA-acetone法改进Tris法Tris法磷酸缓冲液法;(3)Bradford法与2-D Quant Kit法测定的蛋白质浓度均是准确的,且没有显著差异;但是UV法测定的蛋白质浓度欠准确。经综合考虑,改进Tris法用于SDS-PAGE分析,试剂盒改良法用于2-DE分析,Bradford法用于测定蛋白质浓度是经济有效的方法。这对玉米蛋白质组学的研究具有参考价值。
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| 关 键 词： | 蛋白质提取 蛋白质浓度测定 玉米 |
Comparison of Methods for the Extraction and Concentration Determination of Total Protein in Maize |
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| YANG Wen-peng,WANG Ming-chun,YANG Liu-qi,WANG Wei.Comparison of Methods for the Extraction and Concentration Determination of Total Protein in Maize[J].Seed,2010,29(12). |
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| Authors: | YANG Wen-peng WANG Ming-chun YANG Liu-qi WANG Wei |
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| Institution: | YANG Wen-peng1,2,WANG Ming-chun1,YANG Liu-qi1,WANG Wei1 (1.Guizhou Institute of Upland Food Crops,Guiyang 550006,China,2.Guizhou Key Laboratory of Agricultural Biotechnology,China) |
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| Abstract: | The extraction and concentration determination of total protein in maize organs is a key step for proteomic research.In this study.Using maize leaves and silks as materials,6 methods for total protein extraction,i.e.Phosphate Buffer(PB),Tris,Improved Tris,TCA-acetone,Plant Total Protein Extraction Kit and its improved one were compared in respective extraction quantity and quality;simultaneously,3 methods of Bradford,2-D Quant Kit and UV were compared in accuracy of protein concentration determination.The r... |
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| Keywords: | protein extraction protein concentration determination maize |
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