| 猪圆环病毒1型感染性克隆的构建与病毒拯救 |
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| 引用本文： | 刘长明,危艳武,陆月华,张朝霞,袁婧,黄立平. 猪圆环病毒1型感染性克隆的构建与病毒拯救[J]. 中国预防兽医学报, 2008, 30(3): 161-165 |
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| 作者姓名： | 刘长明 危艳武 陆月华 张朝霞 袁婧 黄立平 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 引进国际先进农业科技计划(948计划) , 国家科技支撑计划 |
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| 摘 要： | 用PCR法扩增猪圆环病毒1型（PCV1）全长基因组，将2个基因组顺式连接插入到pUC19质粒载体中构建感染性分子克隆。通过引物设计替换碱基，在病毒基因组内插入SalI酶切位点作为分子靶标，拯救出带有分子标记的克隆病毒，命名为recPCV1／G株。通过免疫过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）在病毒感染细胞中检出病毒抗原，其抗原性仅与PCV1／Cap蛋白单价特异性抗体发生反应，而与抗PCV2／Cap蛋白抗体无交叉。克隆毒株基因组内插入一个SalI酶切位点，可用PCR结合限制性片段长度多态性分析法（PCR-RFLP）与亲本病毒相鉴别。该毒株经细胞连续传10代，体外培养增殖性能稳定，病毒滴度达10^4.8 TCID50/mL。构建的PCV1感染性克隆，为今后开展该病毒的起源与演化、遗传变异规律、分子鉴别诊断等研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒1型 感染性克隆 病毒拯救 病毒 感染性克隆 type porcine clone virus 研究 分子鉴别诊断 变异规律 遗传 起源与演化 滴度 稳定 性能 培养增殖 连续 细胞 亲本 多态性分析法 限制性片段长度 |
| 文章编号： | 1008-0589（2008）03-0161-04 |
| 收稿时间： | 2007-09-12 |
| 修稿时间： | 2007-09-12 |
Construction and virus rescue of an infectious clone of porcine circovirus type 1 |
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| LIU Chang-ming,WEI Yan-wu,LU Yue-hua,ZHANG Zhao-xia,YUAN Jing,HUANG Li-ping. Construction and virus rescue of an infectious clone of porcine circovirus type 1[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2008, 30(3): 161-165 |
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| Authors: | LIU Chang-ming WEI Yan-wu LU Yue-hua ZHANG Zhao-xia YUAN Jing HUANG Li-ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine circovirus type 1 infectious clone virus rescue |
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