| 葡萄卷叶伴随病毒2号p24蛋白基因转化烟草的研究 |
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| 引用本文： | 李捷,程玉琴. 葡萄卷叶伴随病毒2号p24蛋白基因转化烟草的研究[J]. 中国农业大学学报, 2013, 18(6): 138-142 |
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| 作者姓名： | 李捷 程玉琴 |
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| 作者单位： | 中国农业大学 农学与生物技术学院, 北京 100193;中国农业大学 农学与生物技术学院, 北京 100193 |
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| 基金项目： | 现代农业产业技术体系建设专项(CARS-30-bc-1) |
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| 摘 要： | 以含有葡萄卷叶伴随病毒2号(Grapevine leafroll-associated virus 2,GLRaV-2)p24蛋白基因的T载体(p-G2-p24)为模板,PCR扩增该蛋白基因的全长序列及其5''端长300 bp 的正反向片段。将p24蛋白基因全长序列定向克隆到表达载体pCsuper 1300+上,得到重组质粒pCsuper1300-p24。将正反向片段先后插入具内含子的中间载体pBSint上,得到重组的中间载体pBSint-p24-F-R。然后用HindⅢ和SacⅠ双酶切pBSint-p24-F-R,将切下的带内含子的正反向串联片段定向克隆到植物表达载体pCsuper 1300+上,得到含有发夹结构的RNAi重组质粒pCsuper-p24-F-R。将pSuper1300-p24和pCsuper-p24-F-R分别通过农杆菌浸润叶盘法转化本生烟。经过RT-PCR和PCR检测,分别获得了异源表达p24的T0和T1代阳性株系各34和12个,转化pCsuper-p24-F-R的T0和T1代阳性株系各17和7个。该结果可为p24功能研究及培育RNAi介导的抗病毒葡萄新种质提供试验材料。
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| 关 键 词： | 葡萄 异源表达 RNA干扰 RNA沉默抑制子 |
| 收稿时间： | 2013-04-17 |
Research on transgenic tobacco expressing p24 protein geneof Grapevine leafroll-associated virus 2 |
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| LI Jie and CHENG Yu-qin. Research on transgenic tobacco expressing p24 protein geneof Grapevine leafroll-associated virus 2[J]. Journal of China Agricultural University, 2013, 18(6): 138-142 |
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| Authors: | LI Jie and CHENG Yu-qin |
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| Affiliation: | College of Agronomy and Biotechnology, China Agricultural University, Beijing 100193, China;College of Agronomy and Biotechnology, China Agricultural University, Beijing 100193, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | exogenous expression RNA interference RNA silencing suppressor |
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