| 基于环式等温扩增的烟草青枯病病原菌快速检测方法 |
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| 引用本文： | 贾蒙骜,陈兴江,林叶春,商胜华. 基于环式等温扩增的烟草青枯病病原菌快速检测方法[J]. 中国农业大学学报, 2014, 19(1): 93-98 |
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| 作者姓名： | 贾蒙骜 陈兴江 林叶春 商胜华 |
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| 作者单位： | 贵州省烟草科学研究院 烟草行业烟草分子遗传重点实验室, 贵阳 550081;贵州省烟草科学研究院 烟草行业烟草分子遗传重点实验室, 贵阳 550081;贵州省烟草科学研究院 烟草行业烟草分子遗传重点实验室, 贵阳 550081;中国农业大学 农学与生物技术学院, 北京 100193;贵州省烟草科学研究院 烟草行业烟草分子遗传重点实验室, 贵阳 550081 |
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| 基金项目： | 贵州省科学技术基金项目（黔科合J字[2013]2194号）;中国烟草总公司贵州省公司科技计划项目（201022） |
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| 摘 要： | 针对烟草青枯病的防控,开发快速、高效的病原菌检测方法是必要的。环式等温扩增(LAMP)是一种在等温条件下快速完成靶标基因扩增的新方法。将青枯病菌贵州分离株FQY4基因组序列(NCBI号:CP004013)与其他已发表菌株序列比对分析,确定编码鞭毛蛋白的fliC基因的保守区域可被选作检测靶标。根据LAMP原理以及靶标序列的特点,设计了一组由6条引物组成的环式等温扩增反应体系。结果表明:61℃条件下孵育45min,可完成对青枯病病原菌单菌落和带菌烟草叶片的检测,结果判定可以通过颜色变化被肉眼直接识别,也可以通过琼脂糖凝胶电泳检测。通过这种新方法,可以实现对青枯病菌菌落的快速鉴别,还可以用于对田间疑似带病烟草植株的快速检测。
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| 关 键 词： | 烟草 茄科劳尔氏菌 fliC基因 环介导的等温扩增 |
| 收稿时间： | 2013-07-23 |
Rapid and sensitive detection method for Ralstonia solanacearum based on Loop-mediated isothermal amplification |
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| JIA Meng-ao,CHEN Xing-jiang,LIN Ye-chun and SHANG Sheng-hua. Rapid and sensitive detection method for Ralstonia solanacearum based on Loop-mediated isothermal amplification[J]. Journal of China Agricultural University, 2014, 19(1): 93-98 |
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| Authors: | JIA Meng-ao CHEN Xing-jiang LIN Ye-chun SHANG Sheng-hua |
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| Affiliation: | Key Laboratory of Molecular Genetics, Guizhou Academy of Tobacco Science, Guiyang 550081, China;Key Laboratory of Molecular Genetics, Guizhou Academy of Tobacco Science, Guiyang 550081, China;Key Laboratory of Molecular Genetics, Guizhou Academy of Tobacco Science, Guiyang 550081, China;College of Agronomy and Biotechnology, China Agricultural University, Beijing 100193, China;Key Laboratory of Molecular Genetics, Guizhou Academy of Tobacco Science, Guiyang 550081, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | tobacco bacterial wilt disease Ralstonia solanacearum fliC gene Loop-mediated isothermal amplification |
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